[发明专利]用于诊断针对病毒的免疫应答的方法有效
申请号: | 201080054095.5 | 申请日: | 2010-10-21 |
公开(公告)号: | CN102656455A | 公开(公告)日: | 2012-09-05 |
发明(设计)人: | E·C·瑟图特;W·M·刘 | 申请(专利权)人: | 由卫生福利和体育大臣代表的荷兰王国 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 左路 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 荷兰;NL |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 诊断 针对 病毒 免疫 应答 方法 | ||
1.用于检测对象中针对病毒的T细胞应答的方法,其中所述方法包括以下步骤:
a)将来自所述对象的PBMC与用福尔马林灭活的病毒孵育;
b)用流式细胞术检测至少一种T细胞活性标记物的表达。
2.权利要求1的方法,其中检测至少2种不同标记物的表达。
3.权利要求1或2的方法,其中检测表达所述标记物的T细胞的类型。
4.权利要求3的方法,其中所述T细胞的类型为CD4+细胞和CD8+细胞中的至少一种。
5.前述权利要求中任一项的方法,其中所述至少一种标记物选自CD107a、CD107b、IFN-γ、IL-2、IL-10和TNF-α。
6.前述权利要求中任一项的方法,其中所述灭活病毒为灭活流感病毒。
7.权利要求6的方法,其中通过处理病毒获得所述灭活流感病毒,所述处理与用至少0.02% v/v的福尔马林于37℃处理至少18小时产生相同程度的灭活病毒。
8.前述权利要求中任一项的方法,其中在所述PBMC与所述病毒孵育约24-96小时后检测所述标记物的表达。
9.权利要求8的方法,其中在所述PBMC与所述病毒孵育约60-84小时后检测所述标记物的表达。
10.前述权利要求中任一项的方法,其中所述灭活病毒的量对应于活化前的病毒产生约1-3的M.O.I.,优选约2的M.O.I.的量。
11.前述权利要求中任一项的方法,其中所述PBMC来自人对象,并且其中所述灭活病毒为能够感染人或疑似感染人的病毒的灭活形式。
12.用于检测对象中针对病毒的T细胞应答的方法,其中所述方法包括以下步骤:
a)将来自所述对象的PBMC与灭活的病毒孵育;
b)检测PBMC中CD107a和CD107b中至少一种的表达,和任选地检测一或多种其它T细胞特异性细胞因子的表达。
13.权利要求12的方法,其中所述灭活病毒为灭活流感病毒。
14.用于检测针对病毒的T细胞应答的试剂盒,其中所述试剂盒包含装有灭活病毒制备物的容器和装有用于检测T细胞活性标记物的抗体的容器。
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