[发明专利]用于递送干扰RNA的对接锁定(DNL)复合物

说明书

相关申请

本申请要求11/18/2010提交的美国专利申请No.12/949,536；10/29/2010提交的美国专利申请No.12/915,515；8/30/2010提交的美国专利申请No.12/871,345；8/27/2010提交的美国专利申请No.12/869,823；4/6/2010提交的美国专利申请No.12/754,740；4/1/2010提交的美国专利申请No.12/752,649；3/25/2010提交的美国专利申请No.12/731,781；12/22/2009提交的美国专利申请No.12/644,146的优先权。

本申请还要求2009年12月9日提交的美国临时专利申请No.61/267,877、2010年2月8日提交的美国临时专利申请No.61/302,682和2010年11月17日提交的美国临时专利申请No.61/414,592的权益。各优先权申请的正文全部以引用的方式并入本文。

发明背景

发明领域

本发明涉及用于靶向递送RNAi物质(如siRNA)的组合物和方法。优选地，靶向递送复合物包含与siRNA的载体分子偶联的抗体、抗体片段或其它靶向分子，如鱼精蛋白或树枝状聚合物。更优选地，靶向递送复合物是通过对接锁定(dock-and-lock；DNL)技术制备。靶向递送复合物可包含一个或多个用于递送到靶细胞或组织的siRNA物质。最优选地，递送siRNA可有效治疗疾病、综合症或病症，如癌症、自体免疫性疾病、免疫功能障碍(例如移植物抗宿主疾病或器官移植排斥反应)、炎症、感染性疾病、心血管疾病、内分泌或代谢性疾病或神经退化性疾病。对于疾病疗法，抗体或其它靶向分子结合由患病细胞或组织产生或以其它方式与疾病病况相关的靶抗原。DNL复合物可包含多个拷贝的载体分子以有效将治疗性siRNA递送至靶细胞。抗体或其它靶向分子可为快速内化的物质以促进siRNA的细胞内吸收。

相关领域

RNA干扰(RNAi)是天然存在的控制细胞内基因表达的调控机制(Fire等,1998,Nature 391:806-11)。RNAi由RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex；RISC)介导并且由与催化性RISC组分argonaute相互作用的短双链RNA分子起动(Rand等,2005,Cell 123:621-29)。RNAi分子的类型包括微RNA(miRNA)和小干扰RNA(siRNA)。RNAi物质可与信使RNA(mRNA)通过互补碱基配对进行结合并且通过转录后基因沉默来抑制基因表达。与互补mRNA物质结合后，RNAi通过RISC的argonaute组分诱导mRNA分子的裂解。miRNA与siRNA在对特定基因标靶的特异性程度以及其它特征方面不同，其中siRNA对于特定靶基因相对更具特异性，而miRNA抑制多种mRNA物质的翻译。

已尝试利用RNAi通过抑制所选基因表达而在治疗上用于多种疾病病况，如黄斑退化和呼吸道合胞体病毒感染(Sah,2006,Life Sci 79:1773-80)。已提出siRNA在针对病毒感染的宿主细胞防御中起作用并且已将siRNA作为抗病毒疗法的方法进行了广泛研究(参见例如Zhang等,2004,Nature Med 11:56-62；Novina等,2002,Nature Med 8:681-86；Palliser等,2006,Nature 439:89-94)。还尝试了使用siRNA用于癌症治疗。Fujii等(2006,Int J Oncol 29:541-48)用于针对HPV E6和E7的siRNA转染HPV阳性子宫颈癌细胞并且抑制了肿瘤生长。据报导乳癌细胞中siRNA介导的异粘蛋白(metadherin)表达阻断可抑制实验性肺转移(Brown和Ruoslahti,2004,Cancer Cell 5:365-74)。

基于siRNA的疗法的难处包括外源性siRNA的细胞吸收不良和对其它基因的潜在脱靶作用(参见例如Kim等,2009,Trends Molec Med 15:491-500)。Jackson等(2003,Nat Biotechnol 21:635-37)设计了靶向IGF-1R和MAPK14的不同siRNA并且显示含有少至十一个与siRNA物质相同的连续核苷酸的非靶基因的沉默。