[发明专利]校准试剂及其用途

权利要求书

1.校准试剂，其包含通过接头与蛋白质载体连接的肽，其中所述肽包含目的表位。

2.根据权利要求1的校准试剂，其中所述目的表位包含至少一个磷酸化氨基酸。

3.根据权利要求1或2的校准试剂，其中所述肽的长度为12至25个氨基酸。

4.根据权利要求1至3中任一项的校准试剂，其中所述蛋白质载体是牛血清白蛋白（BSA）。

5.根据权利要求1至4中任一项的校准试剂，其中所述接头包含半胱氨酸和8-氨基-3,6-二氧辛酸（8-amino-3,6-Dioxaoctanoic acid）。

6.权利要求1至5中任一项的校准试剂，其中所述肽:蛋白质载体比例在0.3和1之间。

7.产生标准曲线的方法，其包括以下步骤：

a）在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求1至6中任一项的校准试剂，

b）孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）对2个或多个浓度的所述校准试剂的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强度，和

d）关联信号强度和目的表位的量。

8.定量样品中包含目的表位的蛋白质的浓度的方法，其包括

a）在阵列上固定

i）2个或多个浓度的根据权利要求1至6中任一项的校准试剂，和

ii）1个或多个生物学样品，

b）孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度和1个或多个生物学样品中的每一种测量结合的亲和试剂的信号强度，

d）关联信号强度和目的表位的量，和

e）定量1个或多个生物学样品中的包含目的表位的蛋白质。

9.测定目的亲和试剂的检测下限的方法，其包括

a）在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求1至6中任一项的校准试剂，

b）孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强度，

d）关联信号强度和目的表位的量，和

e）测定使用所述亲和试剂可检测的目的表位的最低量。

10.测定目的亲和试剂的灵敏度的方法，其包括

a）在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求1至6中任一项的校准试剂，

b）孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强度，

d）关联信号强度和目的表位的量，由此产生标准曲线，

e）测定标准曲线的线性部分，和

f）测定标准曲线的线性部分的斜率。

11.测定目的亲和试剂的动态范围的方法，其包括

a）在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求1至6中任一项的校准试剂，

b）孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强度，

d）关联信号强度和目的表位的量，由此产生标准曲线，

e）测定标准曲线的线性部分，和

f）测定标准曲线的线性部分的目的校准试剂的浓度范围。

12.测定目的亲和试剂的特异性的方法，其包括以下步骤：

a）在阵列上固定

i）根据权利要求1至6中任一项的校准试剂和

ii）包含与蛋白质载体缀合的对照肽的至少一种样品，其中所述对照肽不包含目的表位，

b）孵育阵列和可检测的目的亲和试剂，

c）测量在阵列上结合的亲和试剂的信号强度，和

d）比较与校准试剂的目的表位相关的信号强度和与对照肽相关的信号强度。

13.根据权利要求12的方法，其中所述可检测的目的亲和试剂在步骤a）前与游离的目的表位肽孵育，且其中在步骤b）中将阵列与亲和试剂和游离肽的混合物孵育。

14.根据权利要求7至13中任一项的方法，其中在基质蛋白存在下固定所述校准试剂。

15.根据权利要求1至6中任一项的校准试剂在产生标准曲线中的用途。

16.基本如本文前述的蛋白质、肽、方法和用途，特别是参考前述实施例。