[发明专利]含有抗HB-EGF抗体作为有效成分的药物组合物

说明书

相关申请

本申请要求基于国际申请PCT/JP2009/003915(2009年8月17日申请)的优先权，将其内容作为参照引入本说明书中。

技术领域

本发明涉及癌的治疗方法及抗癌剂。

背景技术

肝素结合表皮生长因子样生长因子(Heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor：HB-EGF)是属于EGF配体家族的生长因子。缺失HB-EGF基因的敲除小鼠表现出伴有心脏肥大的心功能衰竭等极其严重的表型，出生之后立即死亡(非专利文献1)。这表明HB-EGF与妊娠期心脏的形成有非常密切的关系。另一方面，即使在成人中，其表达也分布在肺、心脏、脑、骨骼肌等比较广的组织中(非专利文献2)，HB-EGF不仅在妊娠期而且在成人中也发挥着对维持生物体功能极其重要的作用(非专利文献3)。

在生物体内，HB-EGF以2种不同的结构体的形式存在，即，在表达HB-EGF的细胞的细胞表面上表达的膜型HB-EGF(以下称作proHB-EGF)、和从细胞中游离存在的分泌型HB-EGF(以下称作sHB-EGF或活性型HB-EGF)。图1表示proHB-EGF及sHB-EGF的结构的模式图。proHB-EGF的前体蛋白质由208个氨基酸构成，从N末端开始由信号肽、前肽、肝素结合域、EGF样域、近膜域、跨膜结构域、胞质域构成。proHB-EGF的前体蛋白质的信号肽被切断后，proHB-EGF以1型膜蛋白质的形式表达。之后，proHB-EGF经过被称作胞外域脱落(ectodomain shedding)的蛋白酶消化，以由73～87个氨基酸残基构成的sHB-EGF的形式被释放到细胞外。上述sHB-EGF仅由2个结构域构成，即，肝素结合域和EGF样域，作为活性型配体与EGF受体(Her1)及EGF受体4(Her4)结合。结果通过位于其下游的ERK/MAPK信号通路，诱导NIH3T3细胞、平滑肌细胞、上皮细胞、角质细胞、肾小管细胞等各种细胞的增殖(非专利文献4)。在经过胞外域脱落的部位引入突变、仅表达proHB-EGF的细胞的增殖能力显著降低。另外，仅表达proHB-EGF的转基因小鼠显示出与HB-EGF敲除小鼠相同的表型。基于上述观察，认为作为HB-EGF的增殖因子的功能主要由分泌型HB-EGF承担(非专利文献5及6)。

另一方面，已知proHB-EGF也在生物体内发挥与sHB-EGF不同的独特的功能。最初已知proHB-EGF作为白喉毒素(DT)的受体发挥功能(非专利文献7及8)。但是，根据此后的研究表明，proHB-EGF在细胞表面与DRAP27/CD9、及整联蛋白(integrin)α₃β₁、硫酸肝素等分子形成复合体，参与细胞粘合和迁移(migration)。另外，表明proHB-EGF利用近分泌机制，通过EGF受体(以下称作EGFR)，抑制邻近的细胞的增殖及诱导邻近的细胞凋亡。如上所述，关于作为针对EGFR的配体的HB-EGF，已知膜型proHB-EGF及分泌型sHB-EGF传递完全相反的信号(非专利文献5及8)。

HB-EGF在癌细胞等各种细胞株中具有强力地促进细胞增殖、细胞运动、浸润的活性。进而，报道了HB-EGF的表达与在正常组织中相比，在胰腺癌、肝癌、食道癌、黑色素瘤、大肠癌、胃癌、卵巢癌、宫颈癌、乳癌、膀胱癌及脑肿瘤等广泛的癌症种类中上升，这表明HB-EGF与癌的增殖和恶性化有密切的关系(非专利文献4及10)。

因此，基于上述发现，尝试了通过抑制HB-EGF的活性，抑制癌细胞的增殖。对于利用了抗HB-EGF中和抗体来抑制HB-EGF的作用的尝试，已经报道了对3T3细胞的DNA合成的抑制效果(非专利文献11)、对角质形成细胞的增殖抑制效果(非专利文献12)、对神经胶质瘤细胞的增殖抑制效果(非专利文献13)、对骨髓瘤细胞的DNA合成抑制效果(非专利文献14)等。

另一方面，还尝试了将与HB-EGF特异性结合的衰减白喉毒素(CRM 197)作为HB-EGF抑制剂使用。实际上在使用移植了卵巢癌癌细胞株的异种移植(xenograft)小鼠模型的药效试验中，在给与CRM197的组中确认到优异的肿瘤缩小效果(非专利文献15)，进而，在癌患者中也进行了使用CRM 197的临床试验(非专利文献16)。WO 2008/047914及WO 2008/047925中公开了使用抗HB-EGF的癌的治疗。