[发明专利]卟啉纳米囊泡

说明书

技术领域

本发明涉及纳米囊泡的领域，更具体地，涉及卟啉囊泡，涉及卟啉囊泡，其是由卟啉结合于磷脂侧链而形成的具有卟啉双分子层的纳米囊泡。

背景技术

受益于大量吸收光的成分的治疗和诊断技术包括荧光和比色检测^1，2、光热和光动力学治疗^3-5，光声层析成像(也称为光声断层成像(optoacoustic tomography))^6-9、光频域成像(optical frequency domain imaging)¹⁰、以及多模技术(multimodal technique)¹¹。由于无机纳米颗粒与光发生强烈的相互作用，因此它们可用作这些技术的试剂。例如，量子点(quantum dot)是贵重的荧光探针，其消光系数范围为10⁵至10⁶M^-1cm^-1，12。由于金纳米颗粒具有约为10⁹至10¹¹M^-1cm^-1数量级的非常高的消光系数，因此其可用于比色检测、光热和光声技术¹³。尽管最近的研究取得了进展¹⁴，但光学活性的无机纳米颗粒仍未实现广泛的临床实践，这可能是由于所负载的药物通常限于纳米粒表面以及出于长期安全性的考虑^15-18。相比之下，人们发现有机纳米颗粒(包括脂质体、胶束、纳米球和聚合物囊泡(polymersome))由于稳定的安全性、生物利用度和药物递送能力而能够被广泛应用于人类治疗¹⁸。然而，由于有机纳米颗粒在近红外处通常不吸收光，因此将它们用作生物光子(biophotonic)也受到限制。虽然超分子组装体可由卟啉(强烈吸光的有机小分子)组成，但由于稳定性、溶解度、或生物光子效用不足，还未将这些构建体作为生物工具进行全面研究。

光动力学治疗将光敏剂与光结合以消灭不想要的细胞。与其他疾病治疗相比，PDT提供了仅当光和光敏剂相交时才能杀死细胞，以使得体内的其他组织和器官免受损害的优势。在过去几十年中，PDT已被认可为眼部疾病²²、皮肤病²³，尤其是肿瘤疾病²4的多种疾病的可行治疗选择。PDT已成为一种有用的癌症治疗，其能够通过单线态氧产生的细胞损伤诱导的坏死或凋亡来破坏不想要的细胞²⁵。由于具有较高的单线态氧量子产量及具有较大的消光系数，卟啉衍生物是使用最广泛的光敏剂²⁶。然而，由于传统的卟啉为疏水性分子，因此通常必须对其进行化学修饰以使其更加亲水或必须使用递送载体。因此，光敏剂的递送是PDT的重要要素。光敏剂的脂质体制剂已被广泛应用²⁷，并且也展现出商业上的成功(Novartis的Visudyne；Biotec的Foscan、Foslip和Fospeg)。

虽然PDT与许多其他治疗相比副作用较小，但对于更为有效的治疗而言，对靶点周围组织的损伤是一个限制因素。因此，靶向于特定的不想要的细胞的PDT是一个有吸引力的构思。然而，由于在干扰抗体功能之前能够结合于抗体的光敏剂数量较低，因此使用抗体使光敏剂改变方向的尝试受到阻碍²⁸。通过抗体将负载有光敏剂的脂质体引导至靶点是不切实际的，这是因为光敏剂在体内从脂质体中迅速重新分布至血清蛋白中。光热治疗是一种有希望的疾病治疗方法，其中在靶部位将光转化为热。所产生的热随后破坏局部组织。光声成像是一种新兴的成像技术，其依赖于纳秒脉冲激光和光热膨胀来产生声波，该声波能够提供任何光学技术的最深深度的结构性分辨率。

发明内容

根据一个方面，提供了包括至少15摩尔％卟啉-磷脂结合物的双分子层的纳米囊泡，其中该卟啉-磷脂结合物包含共价连接于脂质侧链的一个卟啉、卟啉衍生物或卟啉类似物，优选连接于一个磷脂的sn-1位和sn-2位。

根据另一个方面，提供了一种制备纳米囊泡的方法，包括：

a.将卟啉-磷脂结合物与缓冲液混合，其中该卟啉-磷脂结合物包含共价连接于脂质侧链的一个卟啉、卟啉衍生物或卟啉类似物，优选连接于一个磷脂的sn-1和/或sn-2位；

b.挤出步骤(a)的混合物以产生包含至少15摩尔％卟啉-磷脂结合物的双分子层的卟啉-磷脂双分子层纳米囊泡。

根据另一个方面，提供了一种制备纳米囊泡的方法，包括：