[发明专利]生产活的四倍体牡蛎的方法

权利要求书

1.一种生产活的四倍体牡蛎的方法，包括步骤：

用二倍体雄性牡蛎的精子使三倍体雌性牡蛎的卵受精；

阻止第一极体从所述受精卵中排出；和

通过培养所述受精卵来生产活的四倍体牡蛎，

其中阻止第一极体从所述受精卵中排出的步骤包括使所述受精卵接触细胞松弛素B(CB)和6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)。

2.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从所述受精卵中排出的步骤包括使所述受精卵同时接触细胞松弛素B(CB)和6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)。

3.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从所述受精卵中排出的步骤包括使所述受精卵相继接触细胞松弛素B(CB)和6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)。

4.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从所述受精卵中排出的步骤包括：使所述受精卵接触细胞松弛素B(CB)，然后使所述受精卵接触6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)。

5.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从所述受精卵中排出的步骤包括：在受精卵排出第一极体的时间的30％～90％的时间范围内使受精卵接触细胞松弛素B(CB)，然后在受精卵排出第一极体的时间的50％～90％的时间范围内使受精卵接触6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)。

6.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从受精卵中排出的步骤包括：在卵受精之后使受精卵接触细胞松弛素B(CB)5～15分钟，然后在卵受精之后使受精卵接触6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)8.3～15分钟。

7.根据权利要求1的方法，其中，阻止第一极体从受精卵中排出的步骤包括将受精卵加入到二甲亚砜(DMSO)中0.25～1.0ppm浓度的细胞松弛素B(CB)以及二甲亚砜(DMSO)中0.25～1.0ppm浓度的6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)之中。

8.根据权利要求7的方法，其中，阻止第一极体从受精卵中排出的步骤包括将受精卵加入到二甲亚砜(DMSO)中0.25～0.75ppm浓度的细胞松弛素B(CB)以及二甲亚砜(DMSO)中0.25～0.75ppm浓度的6-二甲基氨基嘌呤(DMAP)之中。

9.根据权利要求1的方法，其中，所述接触在受精卵排出第一极体的时间的30％～90％的时间范围内进行。

10.根据权利要求1的方法，其中，所述接触在卵受精后进行5～15分钟。

11.根据权利要求1的方法，其中，所述培养在18℃～30℃的温度以及17ppt～33ppt的盐度的条件下进行。