[发明专利]胰岛细胞片、制造方法及其利用方法

说明书

技术领域

本发明涉及在医学、生物、药物开发、药学等领域有用的胰岛细胞片、制造方法及其利用方法。

背景技术

胰脏是生物体内的重要脏器之一，其由将淀粉酶等消化酶分泌到十二指肠内的外分泌腺和胰岛构成。胰脏的90%以上被外分泌腺所占据，作为内分泌细胞的细胞团的胰岛如岛般漂浮存在于其中。胰岛由4种内分泌细胞构成，即在动物的脏器之一的胰脏中分泌胰高血糖素的α细胞(A细胞)、分泌使血糖量降低的激素胰岛素的β细胞(B细胞)、分泌生长抑素的δ细胞和分泌胰多肽的PP细胞。其中，β细胞是指分散存在于许多脊椎动物的胰脏内的球形内分泌腺组织，主要分泌胰岛素并进行血糖的调节。据说，胰岛的直径为100～300μm，人的情况下，每1mg胰脏有10～20个胰岛，整个胰脏中存在100万个以上的胰岛。啮齿类中，β细胞位于胰岛的中心部，α、δ、PP细胞位于周边部，但是在人中该分布没有啮齿类那样明确。

若该胰岛的功能发生障碍，则会引起严重的疾病。例如，若β细胞的胰岛素分泌断绝，会导致重症糖尿病。在该重症糖尿病病例中，血糖控制多为非常困难，除了糖尿病相关的并发症之外，还多产生胰岛素给药后的低血糖发作，生活质量(QOL)极其不良。

迄今为止，对于这样的重症糖尿病患者进行了各种各样的治疗。其中，胰岛移植是以稳定的胰岛素供给为目的的疗法，与移植胰脏这一脏器本身相比侵袭较低，因而最近开始受到注目。目前，加入了组织工学技术，例如，专利文献1中开发了在生物体外的蜂窝状多孔质体上制造该胰岛的方法；专利文献2中开发了在三维培养装置中制造胰岛的方法等。众多开发者对胰岛移植相关技术进行了研究，但现状是：这里所利用的细胞为胰岛或者胰岛样细胞团，若对它们进行移植，则为了将营养成分和氧供给至该细胞团内部的细胞，不得不在门静脉等血管中或肝脏组织等血流丰富的部位进行移植。近年来，已经确立了与移植方法相关的草案，并且治疗成绩逐渐提高，但是即便如此，据说糖尿病患者1年后的胰岛素给药脱离率也不过45%左右(参照非专利文献1)。作为该方法的问题点，可列举出血液介导的即刻炎性反应(IBMIR)和伴随胰岛导致的栓塞门静脉区域的缺血引起的炎性反应。其结果，丧失了所移植的胰岛的半数以上(参照非专利文献2、3、4)。为了解决这些问题，希望对胰岛进一步实施组织工学加工。

在这样的背景的基础下，专利文献3中记载了下述新型的细胞培养法：在于基材表面包覆了在水中的上限或下限临界溶解温度为0～80℃的聚合物的细胞培养支撑体上，在上限临界溶解温度以下或下限临界溶解温度以上的温度培养细胞，然后设为上限临界溶解温度以上或下限临界溶解温度以下，从而无需进行酶处理而将培养细胞剥离。另外，专利文献4中记载了下述内容：利用该温度响应性细胞培养基材，在上限临界溶解温度以下或下限临界溶解温度以上的温度培养皮肤细胞，然后设为上限临界溶解温度以上或下限临界溶解温度以下，从而以低损伤将培养皮肤细胞剥离。通过利用温度响应性细胞培养基材，变得能对于现有的培养技术实现各种各样的新型的发展。专利文献5中，将该技术进一步发展，发现通过将肝组织内存在的实质细胞制成细胞片，从而可以长期维持肝组织细胞功能，这在现有技术中是很困难的。但是，对于具有特殊形态的胰岛，迄今尚未进行任何研究。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2008-278769号公报

专利文献2：日本特开2006-304791号公报

专利文献3：日本特开平02-211865号公报

专利文献4：日本特开平05-192138号公报

专利文献5：日本再表2007-080990号公报

非专利文献

非专利文献1：The New England Journal of Me dicine,355,1318-1330(2006)

非专利文献2：Xenotransplantation,14(4),288-297(2007)

非专利文献3：Journal of Leukocyte Biology,77(5),587-597(2005)

非专利文献4：Pharmacological Reviews,58,194-243(2006)

发明内容

发明要解决的问题

本发明是为了解决上述那样的与胰岛移植技术相关的问题而进行的。即，本发明提供基于与现有技术完全不同的构思的新型的胰岛细胞片、制造方法及其利用方法。