[发明专利]变异LovD多肽及其用途

权利要求书

1.一种变异LovD多肽，所述变异LovD多肽具有比SEQ ID NO：2的野生型土曲霉(A.terreus)酰基转移酶大至少两倍的催化活性。

2.如权利要求1所述的变异LovD多肽，所述变异LovD多肽包括包含下列的SEQ ID NO：2的氨基酸序列：以下两种突变：L174F和A178L，以及任选地约1至30个额外的突变和任选地约1至20个额外的保守突变。

3.如权利要求1或权利要求2所述的变异LovD多肽，所述变异LovD多肽具有比SEQ ID NO：2的野生型土曲霉酰基转移酶大至少10倍的催化活性。

4.如权利要求1-3的任一项所述的变异LovD多肽，所述变异LovD多肽包括包含一个或多个以下特征并且任选地含有约1至20个额外的保守突变的SEQ ID NO：2的氨基酸序列：

(i)与催化活性增加相关的一个或多个突变；

(ii)与增加的热稳定性相关的一个或多个突变；

(iii)与减少的聚集相关的一个或多个突变；

(iv)与增加的酶稳定性相关的一个或多个突变；以及

(v)选自由I4N、A9V、K26E、R28K、R28S、I35L、C40A、C40V、C40F、S41R、N43Y、C60F、C60Y、C60N、C60H、S109C、S142N、A184T、A184V、N191S、A261T、A261E、A261V、L292R、Q297E、L335M、A377V、A383V、N391D和H404R组成的组的一个或多个突变。

5.如权利要求1-4的任一项所述的变异LovD多肽，所述变异LovD多肽包括包含一个或多个以下特点以及任选地约1至20个额外的保守突变的SEQ ID NO：2的氨基酸序列：

(i)选自由A123P、M157V、S164G、S172N、L174F、A178L、N191G、L192I、A247S、R250K、S256T、A261H、G275S、Q297G、L361M、V370I和N391S组成的组的至少一个突变；

(ii)选自由Q241M、A261H、Q295R和Q412R组成的组的至少一个突变；

(iii)选自由N43R、D96R和H404K组成的组的至少一个突变；

(iv)选自由C40R、C60R和D245E组成的组的至少一个突变；以及

(v)选自由I4N、A9V、K26E、R28K、R28S、I35L、C40A、C40V、C40F、S41R、N43Y、C60F、C60Y、C60N、C60H、S109C、S142N、A184T、A184V、N191S、A261T、A261E、A261V、L292R、Q297E、L335M、A377V、A383V、N391D和H404R组成的组的至少一个突变。

6.一种变异LovD多肽，所述变异LovD多肽包括对应于包括下列的SEQ ID NO：2的氨基酸序列：以下突变A123P、L174F、A178L、N191(S或G)、A247S和L361M，零至约26个选自由Q241M、A261H、Q295R、Q412R、N43R、D96R、H404K、C40R、C60R、D254E、I4N、A9V、K26E、R28K、R28S、I35L、C40A、C40V、C40F、S41R、N43Y、C60F、C60Y、C60N、C60H、S109C、S142N、A184T、A184V、N191S、A261T、A261E、A261V、L292R、Q297E、L335M、A377V、A383V、N391D和H404R组成的组的额外的突变，以及任选地约1至20个额外的保守突变。

7.一种变异LovD多肽，所述变异LovD多肽包括选自表1的氨基酸序列。

8.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码根据权利要求1-7的任一项所述的变异LovD多肽。

9.如权利要求8所述的多核苷酸，所述多核苷酸是适于在宿主细胞中表达所述变异LovD多肽的表达载体。

10.如权利要求8或权利要求9所述的多核苷酸，在所述多核苷酸中编码序列利用为在宿主细胞中表达而优化的密码子。

11.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括编码根据权利要求1-7的任一项所述的变异LovD多肽的多核苷酸。