[发明专利]用于提高血小板水平的肽疗法

说明书

技术领域

本发明涉及调节血小板水平的组合物和方法。

背景技术

血小板，也称为凝血细胞，是存在于哺乳动物血液中并介导血凝块形成和止血的无核细胞片段。另外，血小板释放生长因子在结缔组织的修复和再生中起重要作用并可以促进伤口愈合。血小板是巨核细胞(MK)的最终分化产物，巨核细胞又起源于骨髓的多能干细胞。虽然发现体液因素如血小板生成素(TPO)影响巨核细胞发育的不同细胞步骤，但以多能干细胞开始，以血小板结束的复合物突变、分化和定位过程尚未完全了解。

血小板平均寿命为约5至10天，它们的生理血液水平正常为150,000至450,000/μL。当患者的循环血小板水平下降到该生理范围以下时，接着会出现称为血小板减少(症)的病况。这种病况通常与形成的止血栓子有缺陷和出血关联，其中出血的风险与血小板计数成反比。

骨髓中血小板生成率降低，或血小板消耗、外周中血小板降解的促进，或异常血小板分配都会使血小板水平降低。例如，血小板减少(症)可能是由于抗体介导的血小板破坏或例如恶性浸润或化疗引起的骨髓衰竭造成的。

药物干预在一些情况下是可能的，例如，在诸如免疫介导的血小板减少(其中免疫系统的组分靶向和破坏血小板)的情况下，指出了可以使用免疫抑制药物。但是，对于许多患者而言，唯一批准的治疗方案是血小板输注和骨髓移植。预防性输注要谨慎使用，因为它们可能会因反复使用因为形成血小板同种异体抗体而失去其效力。血小板输注的另外潜在风险包括感染、过敏反应、和溶血反应。在产量减小引起血小板功能障碍或血小板减少时，输注是为活动性出血或严重血小板减少(例如，血小板计数＜10,000/μL)的患者保留的。在由血小板功能障碍引起血小板减少的情况下，输注是为危及生命的出血或CNS出血保留的。

因为TPO已被证明可以促进MK增殖和成熟以及血小板形成(Kaushansky等人，1994)，所以已建议使用TPO治疗血小板减少。已报道，当向正常健康志愿者和癌症患者静脉施用重组人TPO时，它导致血小板计数在施用后5天开始剂量依赖性增大并在10～14天后达到高峰。但是，早期血小板生成素类似物的临床试验已被终止，因为抗体与内源性血小板生成素交叉反应并导致继发血小板减少和出血(Junzhi等人，2001)。在某些条件下，TPO被建议作为维持疗法，而不用于诱导缓解。

其它细胞因子如IL-1、IL-3、IL-6和GM-CSF已被证明对动物巨核细胞的产生起着作用，并在临床研究中表现出血小板生成活性。但是，每个要么表现出不可接受的毒性谱，要么不能使血小板计数显著增大，这些细胞因子在治疗血小板减少中的进一步治疗应用已被终止。

因此，显然存在未满足的作为血小板输注替代物，阻止和/或治疗血小板减少的有效药物的要求。

趋化因子受体CXCR4是在各种各样的正常组织中表达的G-蛋白偶联受体，对胎儿的发育、造血干细胞的动员和幼稚淋巴细胞(naive lymphocyte)的运输起着重要作用(Rossi和Zlotnik，2000)。趋化因子CXCL12(也称为基质细胞衍生因子，或SDF-1)是CXCR4的唯一天然配体。CXCL12在包括肺、肝、骨髓和淋巴结在内的多种组织中组成性表达。

CXCL12与CXCR4的结合可活化多种调节细胞趋化、粘附、生存和增殖的细胞内信号传导通路和效应分子。例如，磷脂酰肌醇-3-激酶通路和丝裂原活化蛋白(MAP)激酶通路受CXCL12和CXCR4调节。

已证明，成熟MK功能性地表达SDF-1受体，CXCR4。还发现，SDF-1体外诱导成熟MK通过内皮细胞层迁移并增多它们的血小板生成。另外，给正常小鼠注射的腺-SDF-1，使该小鼠的血小板计数在3天后增大，而在7～10天后达到高峰，到28天时恢复正常(Lane等人，2000)。

本领域描述了包括CXCR4激动剂和拮抗剂在内的趋化因子受体调制剂的各种用途(Princen等人，2005；Tamamura等人，2005；US 7,169,750)。US 7,435,718公开了用作CXCR4拮抗剂，可用于治疗造血细胞如祖细胞或干细胞，促进细胞繁殖、自我更新、增殖或扩增的速率的某些SDF-1类似肽。US 7,435,718的公开内容揭示了，这些SDF-1类似物可以与另外的活性成分，尤其是TPO，一起配制或给药。