[发明专利]包含表达增强子的真核宿主细胞

权利要求书

1.真核宿主细胞，其包含编码表达增强子的重组核苷酸序列，其中所述表达增强子选自cLC52、RPL33和cLC61。

2.权利要求1所述的宿主细胞，其中所述核苷酸序列来源于巴斯德毕赤酵母。

3.权利要求1或2所述的宿主细胞，所述宿主细胞是真菌细胞，优选酵母细胞，或高等真核细胞，优选是哺乳动物细胞或植物细胞。

4.权利要求3所述的宿主细胞，其中所述酵母细胞是毕赤酵母属的细胞，尤其是巴斯德毕赤酵母菌株的细胞。

5.权利要求1-4中任一项所述的宿主细胞，所述宿主细胞是用于导入编码目的蛋白(POI)的目的基因的wildcard宿主细胞。

6.权利要求1-4中任一项所述的宿主细胞，所述宿主细胞是包含编码POI的重组核苷酸序列的生产细胞，能够产生该POI。

7.巴斯德毕赤酵母宿主细胞，其包含

-编码表达增强子的重组核苷酸序列，其中所述表达增强子选自cLC52、RPL33和cLC61，和

-编码POI的目的基因。

8.编码选自cLC52、RPL33和cLC61的蛋白的核苷酸序列作为表达增强子以提高POI在真核宿主细胞内的表达的用途。

9.制备权利要求6所述宿主细胞的方法，其包括

-提供权利要求5所述的宿主细胞，和

-导入编码POI的核苷酸序列。

10.制备权利要求6所述宿主细胞的方法，其包括

-提供真核宿主细胞，

-导入编码cLC52、RPL33和cLC61中至少一个的核苷酸序列，和

-导入编码POI的核苷酸序列。

11.在真核细胞中产生POI的方法，其包括：

-提供权利要求6所述的生产宿主细胞，

-在细胞培养物中共表达POI和表达增强子，和

-从细胞培养物中获得POI。

12.权利要求11所述的方法，其中所述POI是选自诸如免疫球蛋白或血清白蛋白的血清蛋白、酶、激素、信号分子、基质蛋白、或者它们的片段或衍生物的多肽。

13.权利要求11所述的方法，其中所述POI介导宿主细胞代谢物的产生。

14.权利要求11或12所述的方法，其中所述编码POI的重组核苷酸序列是在质粒上提供的，所述质粒适合整合到宿主细胞的基因组或者在宿主细胞内自主复制。

15.权利要求13所述的方法，其中所述质粒是真核表达载体，优选是酵母表达载体，所述载体包含能够有效导致POI从宿主细胞分泌出来的分泌前导序列和/或能够有效导致POI在宿主细胞内表达的启动子序列。

16.用于权利要求10-14中任一项方法的共同过表达质粒，其包含

-编码POI的重组核苷酸序列，和

-编码选自cLC52、RPL33和cLC61的蛋白的核苷酸序列。