[发明专利]生产用于皮下使用的高度浓缩的免疫球蛋白制品的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2009年5月27日申请的美国临时申请No.61/181,606的优先权，明确地将其全部内容并入本文以供参考以用于所有目的。

背景技术

来自人血浆的免疫球蛋白产品首先在1952年被使用，来治疗免疫缺陷。最初，IgG的肌内或者皮下给药是选择的方法。然而，为了注射为有效治疗多种疾病所必需的大量IgG，人们开发了具有较低浓度IgG(50mg/mL)的静脉内给药产品。静脉内免疫球蛋白(IVIG)通常含有来自超过一千个血液供体的血浆的汇集的免疫球蛋白G(IgG)型免疫球蛋白。IVIG典型地含有超过95％未修饰的IgG，其具有完整的Fc依赖性效应子功能、以及仅为痕量的免疫球蛋白A(IgA)或者免疫球蛋白M(IgM)，IVIG被灭菌，提纯的IgG产品主要用于治疗如下三个主要类型的医学适应症：1.免疫缺陷，比如X-连锁无丙种球蛋白血症、低丙种球蛋白血症(原发性免疫缺陷)、以及获得性损害免疫状况(继发性免疫缺陷)，特征是低抗体水平；2.炎症性疾病和自身免疫疾病；以及3.急性感染。

许多IVIG商品供应商提供了多种IVIG产品。与先前的在再溶解之后溶液中仅含有50mg/mL蛋白质的冷冻干燥IVIG产品相比，最近开发的产品是含有100mg/mL即用型灭菌的、高度提纯和浓缩的人IgG抗体的液体制品。因为IgG产品比如IVIG是用汇集的人血浆制造的，所以来自供体血液的病菌(尤其是可在人身上引起多种疾病的已知病毒)污染是生产工艺中的严重问题。在IgG产品中另一个重要的考虑项目是它们、尤其是作为即用型制品在储存期间的稳定性。与IVIG相比，皮下给药的免疫球蛋白制品在家庭护理治疗可行性和较小副作用方面占优势。为了减少每位点小注射体积的缺点，更高浓度的IgG(例如，含有200mg/mL而不是100mg/mL)将具有明显优势。

在一系列发表的关于血清和血浆蛋白制备方法和特性的重要论文的第四期中，Cohn等(J.Am.Chem.Soc.，1946，68(3)：459-475)首次描述了一种用于醇分级分离血浆蛋白的方法(方法6)，该方法允许用于分离来自人血浆的富含IgG的组分。几年之后，Oncley等(J.Am.Chem.Soc.，1949，71(2)：541-550)发展了Cohn方法，公开了一种可导致分离出更纯的IgG制品的方法(方法9)。

这些方法虽然为整个血浆来源血液因子工业奠定了基础，但不能提供出具有足够高浓度的IgG制品来用于治疗数种与免疫相关的疾病，包括川崎综合症、免疫性血小板减少性紫癜、以及原发性免疫缺陷。这种情况下，人们使用多种技术比如离子交换层析开发出附加的方法来提供更高纯度和更高浓度的IgG剂型。Hoppe等(Munch Med Wochenschr 1967(34)：1749-1752)和Falksveden(瑞典专利No.348942)、以及Falksveden和Lundblad(Methods of Plasma Protein Fractionation(血浆蛋白质分级分离方法)1980)首先使用离子交换层析法用于该目的。

多种现代方法采用沉淀步骤，比如与柱层析相结合的辛酸盐沉淀法(Lebing et al.，Vox Sang 2003(84)：193-201)和Cohn组分(I+)II+III乙醇沉淀法(Tanaka et al.，Braz J Med Biol Res 2000(33)37-30)。最近，Teschner等(Vox Sang，2007(92)：42-55)描述了一种生产10％IVIG产品的方法，其中首先从汇集的血浆中除去冷冻沉淀物，然后进行改进的Cohn-Oncley冷乙醇分级分离，接着进行中间体的S/D处理、离子交换层析、纳滤、以及任选的超滤/渗滤。

然而，尽管通过这些IgG生产方法可得到提高的纯度、安全、以及产率，但仍然需要适用于皮下和/或肌内给药的高度浓缩的IgG制品。本发明可满足这些其他的需要，并且描述了制造具有高浓度IgG的稳定的、高度提纯的、病毒灭活的、即用型的产品的方法。

发明内容