[发明专利]核酸检测

权利要求书

1.用于检测样品中的多种分析物的方法，其包括：

·根据分析物的预期性质选择一个或多个引物，用不同的染料标记每一个引物并将其置于反应容器中；

·将待分析的样品置于所述反应容器中；

·使所述样品经受倍增过程；

·根据大小分离经倍增的样品的组分，此后称作扩增物；

·定量所存在的大小并确定每一种大小的颜色；以及

·将所产生的定量和颜色与已知的数据进行比较，以确定所存在的靶扩增物或每种所存在的靶扩增物的性质或其部分的性质。

2.权利要求1的方法，其中所述倍增过程在单一的反应容器中完成。

3.权利要求1或权利要求2的方法，其中所述分离是通过应用电压完成的。

4.权利要求3的方法，其中分离手段采用电泳。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述引物包含琼脂糖或聚丙烯酰胺。

6.前述权利要求中任一项的方法，其包括将经倍增的样品从反应容器转移至光学检测仪器。

7.权利要求6的方法，其中所述转移是用微流体系统完成的。

8.权利要求6的方法，其中所述光学检测仪器包括毛细管。

9.前述权利要求中任一项的方法，其中所述反应容器为微量滴定孔。

10.前述权利要求中任一项的方法，其中所述倍增过程包括PCR。

11.权利要求10的方法，其中所述PCR过程是如专利说明书WO2008107683中所概述的。

12.前述权利要求中任一项的方法，其中定量所存在的大小和确定每一种大小的颜色包括多元光学检测系统，其具有一个或多个发光源的特征。

13.权利要求12的方法，其中所述发光源包括二极管泵浦固态激光。

14.权利要求12或13的方法，其中所述光学系统采用具有最少6nm分辨率的光谱检测仪。

15.权利要求12或13的方法，其中所述光学系统采用具有1nm分辨率的光谱检测仪。

16.权利要求12-15中任一项所述的方法，其中待分析的波长为500-700nm。

17.权利要求12-15中任一项所述的方法，其中待分析的波长为300-1000nm。

18.前述权利要求中任一项的方法，其中将所产生的定量和颜色与已知的数据进行比较以确定所存在的靶扩增物或每种所存在的靶扩增物的性质或其部分的性质的步骤包括应用去卷积软件，其是基于在所预期的波长带内是否存在光。

19.前述权利要求中任一项的方法，其中标记引物包括用荧光染料标记短的寡核苷酸引物序列。

20.权利要求19的方法，其中所述染料包括一种或多种荧光素、TET、HEX。

21.用于实施前述权利要求中任一项的方法的仪器，其包括：

·反应容器；

·使反应容器中的样品经受倍增过程的工具；

·可操作以根据大小分离扩增物组分的分离台；

·用于定量所存在的大小和确定每种大小的颜色的光学检测工具；以及

·用于将所产生的定量和颜色与已知的数据进行比较以确定所存在的靶扩增物或每种所存在的靶扩增物的性质或其部分的性质的工具。

22.权利要求21的仪器，其中所述反应容器是微量滴定孔。

23.权利要求21或权利要求22的仪器，其中所述样品倍增工具包括PCR仪。

24.权利要求21-23中任一项的仪器，其中用于使扩增物经受分离电压的工具包括电泳仪。

25.权利要求21-24中任一项的仪器，其中所述光学检测工具包括光谱检测仪。

26.权利要求21-25中任一项的仪器，其中所述分离台包括用于向扩增物应用电压的工具。

27.权利要求21-26中任一项的仪器，其包括便携的可手持试剂盒。

28.在核酸扩增过程中分离扩增物的方法，其采用电泳。