[发明专利]双链核糖核酸的聚离子复合物

说明书

技术领域

本发明涉及双链核糖核酸的聚离子复合物，具体涉及核糖核酸的体内递送，更具体地涉及用于核糖核酸药物的药物递送系统。

背景技术

由于其强有力的基因沉默能力，利用双链短干扰RNA（siRNA）的RNA干扰不仅作为研究工具、而且作为治疗对策也是非常有前途的（非专利文献1至4）。然而，在体内应用siRNA仍然局限于局部递送（非专利文献5至8）。该局限性可归因于由于体内的酶促降解造成的siRNA的低稳定性，和/或细胞膜的低渗透性。虽然开发递送载体将可能使siRNA能够明确地通过全身性施用而导入靶组织内，但是关于利用siRNA对肾脏疾病的功效的递送系统仅可获得极少数报道。

脂类接合的siRNA（非专利文献9）或脂质体封装的siRNA（非专利文献10）已表现出在肝脏中积累，并沉默靶基因；然而，siRNA的肾脏分布被认为不过是观察到肾小管细胞中的降解过程、或者向管腔中的排泄过程。以固有细胞（resident cell）响应血液动力学或免疫学紊乱而分泌多种病原性因子为特征的肾小球是用于分子治疗的合理靶标。然而，单独的siRNA（若干纳米长的小分子）被快速排泄到尿液中，而上述脂类接合的siRNA或脂质体封装的siRNA由于其尺寸（数百纳米）和特征难以递送至作为肾小球中结缔组织的系膜细胞等。针对对于肾脏疾病的有效药物的低可得性这一背景，需要开发适于肾小球靶向的利用siRNA的基因沉默的递送系统。

本发明人之前报道了与嵌段共聚物的聚离子复合物可用作带电蛋白质和DNA的递送系统（专利文献1）。本发明人还研究了嵌段共聚物的结构、和制备特别适合递送双链寡核酸的聚离子复合物的方法，并报道了携带形式为高分子胶束的双链寡核酸的嵌段共聚物（专利文献2）。还报道了具有以梳状形式与聚阳离子化合物结合的亲水基作为侧链的载体（接枝共聚物）和RNA的复合物改善RNA在血液中的稳定性和保留性（专利文献3）。专利文献1和2中描述的核酸递送系统预期确保在体内向各种组织稳定的递送，并且是具有数十至数百纳米的尺寸分布的高分子胶束。专利文献3中描述的复合物表现出强效地抑制肝脏中的基因表达，但未描述向肾脏区域的递送。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：JP-B-2690276

专利文献2：WO2005/078084

专利文献3：JP-A-2008-201673。

非专利文献

非专利文献1：Gewirtz, A.M. 2007. J. Clin. Invest. 117:3612-3614

非专利文献2：Akhtar, S.,和Benter, I.F. 2007. J Clin. Invest. 117:3623-3632

非专利文献3：Blow, N. 2007. Nature. 450:1117-1120

非专利文献4：Kim, D.H.,和Rossi, J.J. 2007. Nat. Rev. Genet. 8:173-184

非专利文献5：Savaskan, N.E.,等人，2008. Nat. Med. 14:629-632

非专利文献6：Palliser, D.,等人，2006. Nature. 439:89-94

非专利文献7：Thakker, D.R.,等人，2004. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 101:17270-17275

非专利文献8：Bitko, V., Musiyenko, A., Shulyayeva, O.,和Barik, S. 2005. Nat. Med. 11:50-55

非专利文献9：Soutschek, J.,等人2004. Nature. 432:173-178

非专利文献10：Zimmermann, T.S.,等人2006. Nature. 441:111-114。

发明内容

发明要解决的问题

本发明是考虑上述问题而开发的，并且意在提供用于向组织或细胞递送双链核糖核酸的递送系统等，所述核糖核酸在肾小球、特别是系膜细胞等中的基因沉默中发挥作用。

解决问题的手段