[发明专利]蛋白质间相互作用的高灵敏度检测方法有效
申请号: | 201080023492.6 | 申请日: | 2010-05-28 |
公开(公告)号: | CN102449147A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 小泽岳昌;三泽直美;三浦研二;冈本将;西井重明;增田兼治 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人东京大学;株式会社谱乐贝可思;东洋纺织株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C07K14/47;C07K19/00;C12N9/02;C12Q1/26;G01N21/76;G01N33/566 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 张晶 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 相互作用 灵敏度 检测 方法 | ||
1.具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的融合蛋白。
2.具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列的融合蛋白。
3.一种复合物,其为具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的融合蛋白与具有选自SEQ ID NO:2~6所示氨基酸序列的融合蛋白的复合物。
4.编码选自SEQ ID NO:1~6所示氨基酸序列的DNA。
5.含有编码选自SEQ ID NO:1~6所示氨基酸序列的DNA的载体。
6.一种试剂盒,其包括含有编码SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的DNA的载体以及含有编码选自SEQ ID NO:2~6所示氨基酸序列的DNA的载体。
7.一种检测具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的融合蛋白的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
使该融合蛋白与结合融合蛋白相互作用,形成复合物的步骤,所述结合融合蛋白具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列且可与该融合蛋白结合;以及
检测从所述复合物中释放出的光的步骤。
8.一种检测具有选自SEQ ID NO:2~6所示氨基酸序列的融合蛋白的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
使该融合蛋白与结合融合蛋白相互作用,形成复合物的步骤,所述结合融合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列且可与该蛋白质结合;以及
检测从所述复合物中释放出的光的步骤。
9.一种检测复合物的方法,所述复合物为第一融合蛋白与结合融合蛋白的复合物,所述第一融合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;所述结合融合蛋白具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列且可与第一蛋白质结合,其特征在于,该方法包括检测从所述复合物释放出的光的步骤。
10.一种检测具有相互结合能力的第一融合蛋白与第二融合蛋白间的结合的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
第一融合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,第二融合蛋白具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列,使第一融合蛋白与第二融合蛋白相互作用,形成复合物的步骤;以及
检测从所述复合物释放出的光的步骤。
11.如权利要求10所述的检测方法,其特征在于,该方法还包括以下步骤:使SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列与第一蛋白质融合,制备第一融合蛋白的步骤;以及
使选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列与第二蛋白质融合,制备第二融合蛋白的步骤。
12.一种从蛋白质文库中筛选可与第一融合蛋白结合的结合融合蛋白的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
第一融合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,包含于蛋白质文库中的多个第二融合蛋白具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列,使第一融合蛋白与第二融合蛋白相互作用的步骤;以及
通过检测释放出的光,对与第一融合蛋白形成复合物的结合融合蛋白进行鉴定的步骤。
13.一种筛选可与第一融合蛋白结合的结合融合蛋白的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
第一融合蛋白具有选自SEQ ID NO:2~6所示的氨基酸序列,多个第二融合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,使第一融合蛋白与第二融合蛋白相互作用的步骤;以及
通过检测释放出的光,对与第一融合蛋白形成复合物的结合融合蛋白进行鉴定的步骤。
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