[发明专利]用于治疗疾病的三环DNA反义寡核苷酸、组合物和方法

权利要求书

1.一种三环DNA反义寡核苷酸(tc-DNA AON)，其用于促进肌养蛋白pre-mRNA加工期间外显子的跳跃，所述tc-DNA AON含有10至18个三环核苷酸，其中所述tc-DNA AON的8-16个或6-14个核苷酸与肌养蛋白pre-mRNA的内含子剪接供体位点互补，其中所述tc-DNA AON的2-8个核苷酸与肌养蛋白pre-mRNA的外显子区互补，并且所述内含子剪接供体位点与所述外显子区毗连并位于其5’端。

2.权利要求1的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON的长度选自(i)12至16个核苷酸之间；(ii)13至15个核苷酸之间；以及(iii)15个核苷酸。

3.权利要求1的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON包含6至14个与所述内含子剪接供体位点互补的核苷酸。

4.权利要求1的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON包含2至5个与所述外显子区互补的核苷酸。

5.权利要求1的tc-DNA AON，其中在所述肌养蛋白pre-mRNA加工期间被跳过的外显子是外显子23或外显子51。

6.权利要求5的tc-DNA AON，其中当被跳过的外显子是外显子23时，所述tc-DNA AON包含核苷酸序列5’-AACCTCGGCTTACCT-3’(SEQ ID NO：1)，或者是M23D(+02-13)(SEQ ID NO：1)，并且当被跳过的外显子是外显子51时，所述tc-DNA AON包含选自5’-AGAAATGCCATCTTC-3’(SEQ ID NO：2)、5’-AAATGCCATCTTCCT-3’(SEQ ID NO：3)和5’-TGCCATCTTCCTTGA-3’(SEQ ID NO：4)的核苷酸序列，或者是H51(+68+82)(SEQ ID NO：2)或H51(+70+84)(SEQ ID NO：3)或H51(+73+87)(SEQ ID NO：4)。

7.一种三环DNA反义寡核苷酸(tc-DNA AON)，其用于促进SMN2pre-mRNA加工期间包含非典型外显子，所述tc-DNA AON含有10至18个三环核苷酸，其中所述tc-DNA AON与SMN2 pre-mRNA的内含子沉默序列(ISS)互补。

8.权利要求7的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON的长度选自(i)12至16个核苷酸之间；(ii)13至15个核苷酸之间；以及(iii)15个核苷酸。

9.权利要求7的tc-DNA AON，其中所述SMN2pre-mRNA中的所述非典型外显子是外显子7，并且所述内含子沉默序列是ISS-N1。

10.权利要求9的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON包含核苷酸序列5’-CUUUCAUAAUGCUGG-3’(SEQ ID NO：5)，或者是SMN2i7(10；25)(SEQ ID NO：5)。

11.一种三环DNA反义寡核苷酸(tc-DNA AON)，其用于促进SMN2 pre-mRNA加工期间包含非典型外显子，所述tc-DNA AON由10-18个三环核苷酸构成，其中所述tc-DNA AON与SMN2 pre-mRNA的末端茎-环(TSL)互补。

12.权利要求11的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON的长度选自(i)12至16个核苷酸之间；(ii)13至15个核苷酸之间；以及(iii)13个核苷酸。

13.权利要求11的tc-DNA AON，其中所述SMN2 pre-mRNA中的所述非典型外显子是外显子7，并且所述末端茎-环是TSL2。

14.权利要求13的tc-DNA AON，其中所述tc-DNA AON包含核苷酸序列5’-UUAAUUUAAGGAA-3’(SEQ ID NO：6)，或者是SMN2e7(39；51)(SEQ ID NO：6)。