[发明专利]具有蛋白酶识别序列的标签肽及其应用无效
申请号: | 201080018043.2 | 申请日: | 2010-04-21 |
公开(公告)号: | CN102414218A | 公开(公告)日: | 2012-04-11 |
发明(设计)人: | 高木淳一 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人大阪大学 |
主分类号: | C07K7/00 | 分类号: | C07K7/00;C07K1/14;C07K16/44;C07K19/00;C12N5/10;C12N15/09;C07K1/22;C12P21/08 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 杨青;樊卫民 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 蛋白酶 识别 序列 标签 及其 应用 | ||
1.一种标签肽,具有蛋白酶识别序列,其特征在于,该蛋白酶识别序列与针对该标签肽的抗体的表位重叠。
2.一种标签肽,具有蛋白酶识别序列,其特征在于,该蛋白酶识别序列与针对该标签肽的抗体的表位重叠,该蛋白酶识别序列为烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶识别序列。
3.如权利要求1或2所述的标签肽,其特征在于,具有以下的氨基酸序列(1):
(1)RX1X2LYX3QGKDG(序列号1)
X1、X2和X3相同或不同,表示任意的氨基酸残基。
4.如权利要求3所述的标签肽,其中,氨基酸序列(1)为以下的氨基酸序列(2):
(2)RENLYFQGKDG(序列号2)。
5.一种标签肽,其特征在于,由权利要求1~4中任一项所述的标签肽和第二标签肽组合而成。
6.如权利要求5所述的标签肽,其特征在于,能够同时结合针对权利要求1~4中任一项所述的标签肽的抗体和针对第二标签肽的抗体。
7.一种多核苷酸,其特征在于,编码权利要求1~6中任一项所述的标签肽。
8.一种重组载体,其特征在于,含有权利要求7所述的多核苷酸。
9.针对权利要求1~4中任一项所述的标签肽的抗体。
10.如权利要求8所述的抗体,其为由保藏编号为FERM BP-11245的大鼠-小鼠杂交瘤2H5产生的单克隆抗体。
11.大鼠-小鼠杂交瘤2H5,保藏编号为FERM BP-11245。
12.一种蛋白的纯化方法,其中,包括下述(i)~(iii)的步骤:
(i)使权利要求9或10所述的抗体与含有权利要求1~4中任一项所述的标签肽和目标蛋白的融合蛋白的试样作用而形成融合蛋白与抗体的结合物的步骤;
(ii)使洗脱物质与所述(i)的步骤中得到的结合物作用而使融合蛋白从抗体中游离的步骤;
(iii)从所述(ii)的步骤中得到的融合蛋白上切除标签肽的步骤。
13.一种试剂盒,用于表达、纯化、检测或定量蛋白,其中,包含权利要求8所述的重组载体或者权利要求9或10所述的抗体。
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