[发明专利]复杂疾病的体外诊断方法

说明书

技术领域

本发明涉及如权利要求1所述的复杂疾病或其亚型的体外诊断方法， 和如权利要求18所述的执行所述方法的试剂盒。

在经典患者筛查和诊断中，医务人员利用多种诊断工具对患有某种疾 病的患者进行诊断。在这些工具中，对一系列单一常规参数(例如血液样品 中的参数)进行测定是常见的诊断实验室方法。这些单一参数包括例如酶活 力和酶浓度和/或诸如葡萄糖等代谢指示物的检测。只要涉及到这样的疾 病，并且这些疾病可通过临床化学简单地并且毫无疑义地与一种单一参数 或若干参数相关联，则这些参数就成为了现代实验室医学和诊断中不可或 缺的工具。在能够提供优异的已证实的截断值(cut-off value)的情况下(例如 在糖尿病中)，就可以在诊断中可靠地使用临床化学参数例如血糖。

特别是，当研究公知病理生理机制背后内在的病理生理状态并从中得 出指导性参数时，诸如血液中高葡萄糖浓度通常反映出胰岛素基因的遗传 性缺陷，所述单一参数已证实是“其”疾病的可靠生物标志物。

然而，在诸如癌症或脱髓鞘性病如多发性硬化症等共性为缺乏明确可 指定的单一参数或标志物的病理生理情况下，目前还难以进行由血液样品 或组织样品的差别化诊断。

在癌症预防、筛查、诊断、治疗和预后治疗中，同时在临床常规上使 用一系列均对特定种类癌症在某种程度上有特异性的所谓“肿瘤标志物” 来诊断和监测癌病过程的治疗。目前使用的这种肿瘤标志物例如有α-1-胎 蛋白、癌抗原125(CA 125)、癌抗原15-3、CA 50、CA 72-4、糖抗原19-9、 降钙素、癌胚胎抗原(CEA)、细胞角蛋白片段21-1、粘蛋白样癌相关抗原、 神经元特异烯醇化酶、核基质蛋白22、碱性磷酸酶、前列腺特异性抗原 (PSA)、鳞状细胞癌抗原、端粒酶、胸腺嘧啶激酶、甲状腺球蛋白、和组织 多肽抗原。

虽然，在现有技术中目前已有多种上述肿瘤标志物常规使用，但极常 见的是难以由单一测定实现可靠诊断。仅举一例，CEA的截断值对不吸烟 者为4.6ng/ml，而25％的吸烟者显示在3.5～10ng/ml的范围的正常值，并 且有1％的吸烟者显示大于10ng/ml的正常值。因此，只有大于20ng/ml 的值才被解释为“高度疑似恶性过程”，这留下了很大的灰色区域，在这一 区域中医生不能依靠在患者样品中测定的CEA值。

EP 540 573 B1公开了对于前列腺特异性抗原(PSA)的相似的截断值问 题，其中通常测定总PSA以诊断或排除患者的前列腺癌，如果该值在灰色 区域，则目前的方法是除了测定总PSA外还以对游离PSA特异的单克隆 抗体测试测定游离PSA，并计算2个参数的比率从而获得对前列腺癌更准 确的诊断方法，并与良性前列腺增生相区分。

CEA和PSA检测的上述例子充分表明了所有单一肿瘤标志物共有的 情况，即，一方面特异性相对较差，另一方面截断值不确定不可靠，从而 难以解读得到的值。

因此，一般的结果是，推荐在重要筛查中考虑使用肿瘤标志物。下述 情况并不罕见，肿瘤标志物水平增加而没有进一步的临床相关性，使患者 丧失勇气，并且根本不具有任何诊断价值。

此外，在恶性疾病的预后治疗中，需要注意的是每种肿瘤标志物都首 选需要“临界量”的癌细胞，直到其在临床测试中有阳性响应。另外，不 是所有复发肿瘤都必须涉及肿瘤标志物水平的增加。

总之，大多数情况中只有在结合其他诊断工具如内窥镜和活检以及随 后的组织学检验的情况下，单一肿瘤标志物才被证实在临床实践中有用， 但在常规癌症筛查中是不可靠的。

对于单一肿瘤标志物的现有技术，一个巨大的进步是使用了利用微阵 列技术的多基因表达水平。