[发明专利]PKN3/RhoC大分子复合体及其使用方法

权利要求书

1.鉴定可用于治疗癌症的化合物的方法，所述方法包括：

a.将细胞与测试化合物接触，所述细胞是离体的并包含PKN3多肽或其片段、RhoC多肽或其片段和PDK1多肽或其片段；

b.确定复合体的测试水平，所述复合体是在存在所述测试化合物时形成的，且所述复合体包含PKN3多肽、RhoC多肽和PDK1多肽；和

c.将步骤(b)中确定的测试水平与参照相比较，

其中在步骤(c)中，步骤(b)中确定的测试水平与所述参照之间的差异代表所述测试化合物具有癌症治疗潜能。

2.权利要求1的方法，其中所述细胞选自PC3细胞、HEK293细胞、MDA-MB231细胞和HeLa细胞。

3.权利要求1-2中任一项的方法，其中所述PKN3多肽包含分子标签，所述分子标签选自FLAG标签、GST标签和Myc标签，且通过其分子标签捕获PKN3多肽而分离所述复合体。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述参照是(a)在缺乏所述测试化合物的情况下形成的包含PKN3多肽和RhoC多肽的复合体的水平，或(b)在存在所述测试化合物的情况下形成的包含PKN3多肽和RhoC多肽的复合体的水平，其中所述PKN3多肽或PDK1多肽无激酶活性。

5.诊断患者的癌症的方法，包括：

a.从患者获得样品；

b.确定所述样品中PKN3活性的水平和RhoC活性的水平，由此产生测试水平；和

c.将所述测试水平与参照比较，

其中所述测试水平与所述参照之间的差异代表所述癌症是进展性的可能性。

6.鉴定会对癌症治疗有反应的患者的方法，包括：

a.从患者获得样品；

b.确定所述样品中PKN3活性的水平和RhoC活性的水平，由此产生测试水平；和

c.将所述测试水平与参照比较，

其中所述测试水平与所述参照之间的差异代表所述患者将对癌症治疗发生反应的可能性。

7.权利要求5或6的方法，其中所述参照包含在非癌症组织中确定的PKN3活性和RhoC活性的水平。

8.权利要求5-7中任一项的方法，其中所述测试水平高于所述参照。

9.确定患者的癌症治疗性处理方案的效果的方法，包括：

a.从患者获得第一样品；

b.确定所述第一样品中的PKN3活性的水平和RhoC活性的水平，由此产生第一水平；

c.给所述患者施用所述处理方案；

d.在施用所述处理方案后从所述患者获得第二样品；

e.确定所述第二样品中的PKN3活性的水平和RhoC活性的水平，由此产生第二水平；和

f.比较所述第一和第二水平，

其中PKN3活性和RhoC活性的第二水平相对于第一水平均降低代表所述处理方案对所述患者的癌症是有效的。

10.权利要求5-9中任一项的方法，其中所述PKN3活性选自(i)表达编码PKN3多肽或其片段的RNA，(ii)表达PKN3多肽或其片段，(iii)PKN3多肽的磷酸化，和(iv)糖原合酶激酶3(GSK-3)-衍生肽的磷酸化。

11.权利要求5-10中任一项的方法，其中所述RhoC活性选自(i)表达编码RhoC多肽的RNA，(ii)表达RhoC多肽，(iii)PKN3多肽的磷酸化，和(iv)糖原合酶激酶3(GSK-3)的磷酸化。

12.权利要求10或11的方法，其中以抗体检测所述PKN3多肽的磷酸化，所述抗体结合PKN3转角基序磷酸化位点T860。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述PNK3多肽包含(a)与SEQ ID NO：26具有至少95％相同性的氨基酸序列，或(b)与SEQ ID NO：36具有至少95％相同性的氨基酸序列。

14.权利要求1-13中任一项的方法，其中所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、肝细胞癌、膀胱癌、结直肠癌、皮肤黑素瘤和前列腺癌(CaP)。

15.多肽，包含结合PKN3转角基序磷酸化位点T860的互补决定区(CDR)。

16.权利要求15的多肽，其中所述多肽是单克隆抗体。