[发明专利]制备乳酸菌组合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备至少2kg(干重)乳酸菌组合物的方法，所述组合物以1％至50％的抗坏血酸盐或抗坏血酸(w/w-干物质)作为抗氧化剂进行配制，其中通过添加不包含NH₃(氨)的碱使得在至少大部分发酵过程中pH被控制在3≤pH≤8。

背景技术

乳酸菌涉及一类革兰氏阳性、不生成芽孢的细菌，其进行糖的乳酸发酵。

例如，乳酸菌在商业上广泛地用于制备不同的食品，例如酸乳。

此外，很多乳酸菌是益生菌——即，当以足够的量施用时给予宿主(例如人)健康益处的活微生物。

乳酸菌产品在商业上常常作为干燥组合物-例如冻干组合物进行销售。干燥组合物可以例如是干燥球团或片剂(例如由磨碎的干燥球团制得)。

用于人类或动物消费的乳酸菌(例如干燥的乳酸菌)往往以抗坏血酸或抗坏血酸盐(诸如例如抗坏血酸钠)作为抗氧化剂进行配制——抗坏血酸钠例如改善乳酸菌产品的贮存稳定性。

抗坏血酸钠是抗坏血酸的盐(维生素C)，其具有通用的E-编号E301(参见EU食品添加剂法规)。抗坏血酸钠和抗坏血酸的结构示于本文图1。

文章——L.Kurtmann等人，“Storage stability of freeze-dried Lactobacillus acidophilus(La-5)in relation to water activity and presence of oxygen and ascorbate”；Cryobiology(2009)，doi:10.1016/j.cryobiol.2008.12.001-于2008年12月公开在互联网上。

L.Kurtmann等的文章描述：当抗坏血酸钠存在时，在贮存期间在干燥的嗜酸乳杆菌组合物/样品的表面上观察到粉色/红色颜色(参见例如摘要)。

这样的粉色/红色颜色是不希望有的——例如很多消费者不喜欢这样的粉色/红色颜色，因为它可能给干燥的乳酸菌产品带来不健康的“外表”。

在发酵过程中，乳酸菌产生乳酸——因此，为了在生产过程中不获得过低的pH，在发酵过程中通过添加碱来控制pH。

通常，控制pH使得在发酵过程的至少大部分具有3≤pH≤8，因为乳酸菌通常在pH低于3不适当地生长。

在L.Kurtmann等的文章中，使用了来自Chr.Hansen A/S的嗜酸乳杆菌这篇文章泛泛地陈述在发酵过程中pH被控制(参见材料与方法)。没有提及如何进行pH控制。

使用NH₃作为碱对于在工业上进行乳酸菌产品的商业相关生产颇为正常——事实上，这也许被认为是“标准”。

上文讨论的L.Kurtmann的文章第179页右栏指出：来自细菌细胞或来自发酵残余物的氨基可能与不希望有的粉色/红色颜色的产生有关——文章称：“当抗坏血酸被氧化称脱氢抗坏血酸并与形成色素的氨基反应时形成红色化合物”。

如下进一步论述——事实上，可以说L.Kurtmann的文章这一披露的理论偏离了本发明的教导(即，不使用包含NH₃的碱)。

EP-A-1038951(Nestle[CH])披露了一种用于培养细菌的培养基，所述培养基包含作为抗氧化剂的抗坏血酸，并包含如Na₂CO₃、KH₂PO₄的缓冲剂(参见第3页、权利要求3和4)。

描述，例如，抗坏血酸简单地作为发酵培养基中适宜的抗氧化剂的例子被提供。

换言之，EP-A-1038951没有直接并毫无疑义地披露制备细菌的方法，其中抗坏血酸被添加到收集的细菌浓缩物——即如下所论述，EP-A-1038951没有明确地披露如本文中所述的本发明第一方面(权利要求1)的步骤(iii)。

发明内容

本发明要解决的问题是提供一种制备以抗坏血酸盐或抗坏血酸作为抗氧化剂配制的乳酸菌组合物(例如干燥的组合物)的新方法，其中所述组合物在其贮存过程中不产生显著的粉色/红色颜色。

本发明人发现不希望有的粉色/红色颜色产生与以抗坏血酸钠配制的不同乳酸菌培养物相关——即，不仅是L.Kurtmann的文章中分析的嗜酸乳杆菌组合物/样品。

如本文实施例所示——所述粉色/红色颜色也存在于其他的商业相关培养物中，例如鼠李糖乳杆菌嗜热链球菌(TH-4^TM)和动物双歧杆菌培养物。