[发明专利]用于在植物中表达的多结构域酶的修饰

权利要求书

1.一种用于在植物细胞中表达多结构域酶的方法，包括向所述植物细胞中引入核酸构建体，该核酸构建体包括编码修饰的多结构域酶的核苷酸序列，其中所述多结构域酶包括至少一个第一结构域、至少一个第一连接序列、以及至少一个第二结构域，其中所述第一结构域以及所述第二结构域是非异源的序列，其中在所述修饰的多结构域酶中的天然连接序列已经被异源连接序列所代替，其中所述异源连接序列是不被植物蛋白酶切割的连接序列。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述异源连接序列源自微生物。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述修饰的多结构域酶的所述异源连接序列当在所述植物细胞中表达时是糖基化的。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述异源连接序列被修饰以去除至少一个植物蛋白酶切割位点。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述植物细胞表达所述修饰的多结构域酶，其中全长多结构域酶是由所述植物细胞产生的。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述异源连接序列选自下述组成的组：SEQ ID NO：18、19、和20。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述多结构域酶选自下述组成的组：纤维素酶和葡糖淀粉酶。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述植物细胞选自下述组成的组：稻、小麦、包括玉米的作物(corn)、大豆、糖甜菜(sugar beet)、和甘蔗植物细胞。

9.一种植物细胞，包括一种核酸构建体，该核酸构建体包括编码修饰的多结构域酶的核苷酸序列，其中所述多结构域酶包括至少一个第一结构域、至少一个第一连接序列、以及至少一个第二结构域，其中在所述修饰的多结构域酶中的天然连接序列已经被异源连接序列所代替，其中所述第一结构域以及所述第二结构域是非异源序列，其中在所述修饰的多结构域酶中的天然连接序列已经被异源连接序列所代替，其中所述异源连接序列是不被植物蛋白酶切割的连接序列。

10.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述异源连接序列源自微生物。

11.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述修饰的多结构域酶的所述异源连接序列当在所述植物细胞中表达时是糖基化的。

12.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述异源连接序列被修饰以去除至少一个植物蛋白酶切割位点。

13.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述植物细胞表达所述修饰的多结构域酶，其中全长多结构域酶是由所述植物细胞产生的。

14.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述异源连接序列选自下述组成的组：SEQ ID NO：18、19、以及20。

15.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述多结构域酶是纤维素酶。

16.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述植物细胞选自下述组成的组：稻、小麦、包括玉米的作物(corn)、大豆、糖甜菜(sugar beet)、和甘蔗植物细胞。

17.一种植物，包括如权利要求9-16中任一项所述的植物细胞。

18.由如权利要求17所述的植物产生的转基因种子。

19.一种从植物生物质生产可发酵糖的方法，所述方法包括：

(a)获得包括核酸构建体的植物，该核酸构建体包括编码修饰的多结构域酶的核苷酸序列，其中所述多结构域酶包括至少一个第一结构域、至少一个第一连接序列、以及至少一个第二结构域，其中在所述修饰的多结构域酶中的天然连接序列已经被异源连接序列所代替，其中所述第一结构域以及所述第二结构域是非异源序列，其中所述异源连接序列是不被植物蛋白酶切割的连接序列，并且其中所述多结构域酶涉及植物材料到可发酵糖的转化；

(b)使所述植物在其中核酸构建体被表达的条件下生长；和

(c)在一种生物质转化方法中使用所述植物。