[发明专利]包含小麦醇溶蛋白序列的多核苷酸及其在RNAi沉默中的用途

权利要求书

1.与包含由间隔序列隔开的两条序列对(a1-a2)和(b2-b1)的序列具有至少90％同一性的多核苷酸，其中：

a.序列a1、a2、b1和b2各不相同，以下列形式选自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4：

b.如果a1是SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4，b1是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：1，以及a2是SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3，并且

c.如果a1是SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3，b1是SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：2，以及a2是SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4。

2.包含由间隔序列隔开的两条序列对(a1-a2)和(b2-b1)的多核苷酸，其中序列a1、a2、b1和b2如权利要求1中(a)-(c)段所述。

3.权利要求1或2所述的多核苷酸，其中a1是SEQ ID NO：1，a2是SEQ ID NO：2，b2是SEQ ID NO：3，并且b1是SEQ ID NO：4。

4.权利要求1-3中任一项所述的多核苷酸，其中间隔序列是SEQ IDNO：5。

5.权利要求1-4中任一项所述的多核苷酸，还包含与其5’端功能性连接的基因表达调控序列。

6.权利要求1-5中任一项所述的多核苷酸，其中所述基因表达调控序列是SEQ ID NO：6和/或SEQ ID NO：7。

7.由权利要求1-6中任一项所述的多核苷酸编码的RNA序列，其能够形成hpRNA，其中对a1-a2编码的序列与对b2-b1编码的序列完全杂交。

8.权利要求7的hpRNA序列产生的siRNA。

9.包含权利要求1-6中任一项所述的多核苷酸的表达载体。

10.用权利要求9的表达载体转染的分离的细胞。

11.包含权利要求10的转染细胞的遗传修饰的植物。

12.权利要求11的植物，其属于小麦属。

13.权利要求12的植物，其属于普通小麦(Triticum aestivum)或波斯小麦(Triticum turgidum)。

14.权利要求13的植物，其中所述植物是Bobwhite栽培变种或DonPedro栽培变种。

15.权利要求11-14任一项的植物产生的种子。

16.权利要求11-14任一项的植物产生的花粉、繁殖体、子代或植物部分。

17.权利要求1-6中任一项所述的多核苷酸在沉默小麦属α、β、γ、ω醇溶蛋白中的用途。

18.权利要求9的载体在沉默小麦属α、β、γ、ω醇溶蛋白中的用途。

19.权利要求10的细胞在沉默小麦属α、β、γ、ω醇溶蛋白中的用途。

20.权利要求15的种子在制备食物组合物中的用途。

21.权利要求20的组合物在制备功能性食品、维他命补充剂或营养补充剂中的用途。

22.获得权利要求11-14任一项所述的遗传修饰的植物的方法，包括下列步骤：

a.选择植物的一部分，

b.将根据权利要求9的载体转染到a的植物部分的细胞中，

c.选择b的转染的细胞，其包括根据权利要求1-6任一项的多核苷酸，

d.从c中选择的细胞再生至少一种植物，

e.选择一种或多种根据d再生的植物，其中多核苷酸被转录成hpRNA，并且

f.选择一种或多种根据e获得的植物，其种子显示α、β、γ、ω醇溶蛋白的沉默。