[发明专利]一种定量检测Exendin-4的酶免疫分析方法有效

专利信息
申请号: 201010620868.3 申请日: 2010-12-31
公开(公告)号: CN102175872A 公开(公告)日: 2011-09-07
发明(设计)人: 邹卫;窦燕峰;王晓婧;赵丽艳;解茹;赵艳娥;曹卫荣;解凤立;周青青 申请(专利权)人: 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/543
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 冯琼;李玉秋
地址: 050051 河*** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 一种 定量 检测 exendin 免疫 分析 方法
【权利要求书】:

1.一种定量检测Exendin-4的酶免疫分析方法,包括以下步骤:

步骤1:用第二抗体包被酶标板,洗板,B SA封闭,洗板;

步骤2:加抗Exendin-4第一抗体孵育,洗板;

步骤3:加Exendin-4标准品及样品,并设立对照,加生物素标记Exendin-4孵育,洗板;

步骤4:加辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素孵育,洗板;

步骤5:加pH7.5的PBS配制的0.5-2mg/ml HPPA和过氧化物溶液的混合液避光孵育,加甘氨酸缓冲液终止反应;

步骤6:于荧光酶标仪上读取相对荧光单位值,根据标准品浓度及其对应的相对荧光单位值制作标准曲线,计算出样品中Exendin-4含量。

2.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述第二抗体浓度为5-30μg/ml。

3.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述Exendin-4标准品及样品的基质选自血清、血浆。

4.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,生物素标记Exendin-4浓度为1μg/ml。

5.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,HPPA浓度为1.25mg/ml。

6.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述过氧化物溶液为30%双氧水。

7.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,Exendin-4为通过基因工程重组或化学合成。

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