[发明专利]一种定量检测Exendin-4的酶免疫分析方法有效
| 申请号: | 201010620868.3 | 申请日: | 2010-12-31 |
| 公开(公告)号: | CN102175872A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
| 发明(设计)人: | 邹卫;窦燕峰;王晓婧;赵丽艳;解茹;赵艳娥;曹卫荣;解凤立;周青青 | 申请(专利权)人: | 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 冯琼;李玉秋 |
| 地址: | 050051 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 定量 检测 exendin 免疫 分析 方法 | ||
1.一种定量检测Exendin-4的酶免疫分析方法,包括以下步骤:
步骤1:用第二抗体包被酶标板,洗板,B SA封闭,洗板;
步骤2:加抗Exendin-4第一抗体孵育,洗板;
步骤3:加Exendin-4标准品及样品,并设立对照,加生物素标记Exendin-4孵育,洗板;
步骤4:加辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素孵育,洗板;
步骤5:加pH7.5的PBS配制的0.5-2mg/ml HPPA和过氧化物溶液的混合液避光孵育,加甘氨酸缓冲液终止反应;
步骤6:于荧光酶标仪上读取相对荧光单位值,根据标准品浓度及其对应的相对荧光单位值制作标准曲线,计算出样品中Exendin-4含量。
2.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述第二抗体浓度为5-30μg/ml。
3.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述Exendin-4标准品及样品的基质选自血清、血浆。
4.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,生物素标记Exendin-4浓度为1μg/ml。
5.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,HPPA浓度为1.25mg/ml。
6.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,所述过氧化物溶液为30%双氧水。
7.根据权利要求1所述的酶免疫分析方法,其特征在于,Exendin-4为通过基因工程重组或化学合成。
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