[发明专利]一种测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的方法及试剂装置

权利要求书

1.一种测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的方法，其特征在于：所述方法是通过酶联免疫检测的分析试剂装置和配套试剂组成的试剂盒来实现的，这种分析试剂装置包括设有8个孔位的基体和位于基体一端的手柄，它通过专用特定分析仪器对试剂装置各孔之间的各种特定试剂溶液进行加注和吸弃，使样品与试剂发生反应，然后测量发生反应后溶液色泽的数值，最终通过对测量的数值进行处理而获得检测结果。

2.根据权利要求1所述的测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的方法，其特征在于：所述的方法是将待测样品中的待测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M与高度纯化的天然β2糖蛋白I抗原进行反应而形成第一免疫络合物，该第一免疫络合物与酶标记的第二抗体进行反应形成第二免疫络合物，将反应形成的第二络合物与显色底物进行显色对比分析，从而获得待测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的含量。

3.根据权利要求2所述的测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的方法，其特征在于：所述的第二抗体为辣根过氧化物酶标记的抗人IgG/A/M抗体。

4.一种用于测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的试剂装置，其特征在于：所述的试剂装置设有8个孔位的基体、位于基体一端的手柄，以及用于酶联免疫法检测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的分析试剂装置以及相应数量的配套试剂校准品、质控物和缓冲洗涤液的组份。

5.根据权利要求4所述的用于测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的试剂装置，其特征在于：所述基体一端的手柄上粘贴有检测试剂条形码的标帖，所述条形码的数值包含每项检测所对应的检测项目代码、检测试剂生产批号、试剂有效期、定性校正值/定量测定标准曲线参数、酶联免疫反应类型、试剂及分析装置的序列号的信息。

6.根据权利要求4所述的用于测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的试剂装置，其特征在于：所述孔位包括一个反应孔、一个样品孔、一个稀释孔和五个试剂孔，其中，

1)样品孔盛容待测溶液；

2)稀释孔用于样品的稀释；

3)反应孔为平底并具有很高的光源/光路通透性，当盛装无色/空白试剂溶液时对可见光/紫外光/荧光的吸光度值趋近于零，孔内包被有检测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M所需的高度纯化的天然β2糖蛋白I抗原，该孔用于盛容检测样品和检测试剂，并与这些样品和试剂发生酶联免疫反应，是酶联免疫反应和色泽显示及检测的容器；

4)每一个试剂孔盛装有酶联免疫法检测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M所需的一种试剂，加注试剂后用薄膜将微孔的开放口缘进行封闭。

7.根据权利要求6所述的用于测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的试剂装置，其特征在于：所述试剂孔内所盛装酶联免疫检测所需的试剂包括检测抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M之酶联免疫反应所需的免疫反应抑制剂/中和剂/阻断剂/吸附剂、酶结合物溶液、显色底物溶液、显色终止液、反应增强剂/促进剂、样品稀释溶液。

8.根据权利要求6所述的用于测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的试剂装置，其特征在于：所述样品孔、反应孔、稀释孔和试剂孔剖面形状包括平型、V型或U型，抑或是平型、V型和U型之间的任意组合。

9.根据权利要求1所述的测定抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的方法，其特征在于：所述的方法包括如下的步骤：

1)开机：打开仪器开关后，仪器会自动地进行一系列检查，从而为仪器的正常运行做准备；

2)检查程序的准备：按要求配置好相应的溶液，包括：缓冲洗涤液、清洗液、消毒液和蒸馏水或去离子水，配制完毕装入相应的液体罐中；

3)冲洗检查：

4)预热：在开机后，仪器会启动加热程序，将温度调至待检温度；

5)与主机连机：仪器通过RS232串口可以和主机相连，从而将仪器正常工作所得结果交由集中式系统处理；

6)抗β2糖蛋白I抗体IgG/A/M的检测：所述的检测又包括如下的步骤：

i.从有密封口的一边打开包装袋，取用所需数量的分析装置，排除空气后将袋口封紧；

ii.检查分析装置试剂孔中的底物，应为无色泽改变，否则应弃掉；

iii.分别在每个分析装置的样品孔中加50～100μL未稀释的样品，每更换一个批号的试剂，应取其中一个分析装置及校准品进行仪器校准；

iv.放置分析装置到仪器中相应的分析装置托盘中，按照使用说明书进行校准和检测；

v.按照所需检测的数量在分析装置托盘中放入相对应数量的分析装置，并在检测位置之前放入含有校准品和质控物的分析装置，仪器可自动地识别分析装置条码、质控物条码和校准品条码，选择行可定位于“样品”栏或“检测”栏；

vi.点击开始，运行项目表，扫描各个分析装置条码，对质控物，校准品以及检测样品进行编号；

vii.运行检测表，仪器根据条码信息自动运行，根据条码，仪器会选择相应设置好的标准曲线，程序首先检测校准品，以此来校准仪器内预设的曲线；其次对质控物进行检测，如果其检测结果在标示的范围内，则表示内置曲线合格，可用于样品的检测，最后开始样品的检测程序；

viii.稀释：加注针会从样品孔自动吸取样品，刺破孔位密封薄膜自动吸取稀释液在稀释孔进行样品稀释，动作完成后，被稀释的样品会被加注针移至试剂孔反应一段程序设定的时间，之后移除液体；

ix.洗涤：加注针会从相应的液罐中吸取一定量的洗涤液对试剂孔进行三到五次洗涤后移除液体；

x.加注针刺破试剂孔密封薄膜吸取一定量的辣根过氧化物酶标记的抗人IgG/A/M抗体至试剂孔进行反应，反应一段程序设定的时间后移除液体；

xi.重复步骤ix洗涤；

xii.加注针刺破试剂孔密封薄膜吸取一定量的酶反应底物至试剂孔进行一段程序设定的时间反应；

xiii.加注针刺破试剂孔密封薄膜吸取一定量的终止液加注至试剂孔，在10分钟内于450nm读取OD值，如果选择双波长法测定，参考波长为620nm～690nm；

7)检测结果：当检测程序运行完毕，点击与主机的数据传输，仪器会自动将正常工作所得结果发送到主机交由外接数据处理软件分析，最后生成报告单以便查阅；

8)关机：检测结束后，在仪器关机前，必须启动洗涤循环，这样可以避免来自溶液中的残留盐份在液路中结晶，避免损坏仪器或导致检测结果无效，洗涤完成后，仪器电源自动关闭。