[发明专利]血液1,5-脱水葡萄糖醇的检测方法及试剂盒有效
| 申请号: | 201010615008.0 | 申请日: | 2010-12-30 |
| 公开(公告)号: | CN102175670A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
| 发明(设计)人: | 杜爱铭;刘瑶;刘希;蔡华雅 | 申请(专利权)人: | 北京九强生物技术股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;C12Q1/30;C12Q1/28;C12Q1/26 |
| 代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟 |
| 地址: | 100083 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 血液 脱水 葡萄糖 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的方法,所述方法通过下述反应测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量:
其中,利用葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶清除血液中的葡萄糖,随后利用吡喃糖氧化酶催化1,5-脱水葡萄糖醇产生过氧化氢,色原与过氧化氢在辣根过氧化物酶的催化作用下产生有色底物,进行比色分析由此确定血液1,5-脱水葡萄糖醇的含量。
2.根据权利要求1所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的方法,进一步包括下述步骤:加入亚铁氰化钾与表面活性剂的组合消除样本中高胆红素对样本测值的影响。
3.根据权利要求1或2所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的方法,进一步包括下述步骤:加入表面活性剂消除样本中甘油三酯对样本测值的影响和/或加入抗坏血酸氧化酶消除样本中高抗坏血酸对样本的影响。
4.一种测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的试剂盒,包括试剂I和试剂II两部分,其中试剂I含有葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸氧化酶、表面活性剂、亚铁氰化钾、缓冲液、防腐剂、稳定剂;试剂II含有吡喃糖氧化酶、4-氨基安替比啉、辣根过氧化物酶、3-羟基-2,4,6-三羟基苯甲酸、缓冲液、防腐剂、稳定剂。
5.根据权利要求4所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的试剂盒,每升试剂I溶液中各组分的含量为:
葡萄糖氧化酶 1-50KU
过氧化氢酶 1-20KU
抗坏血酸氧化酶 1-20KU
表面活性剂 0.01-10%
亚铁氰化钾 0.1-10000umol
磷酸盐缓冲液 1-500mmol
稳定剂 0.01-10%
防腐剂 0.01-10%;
每升试剂II中各组分的含量为:
吡喃糖氧化酶 1-500KU
4-氨基安替比啉 0.1-5mmol
辣根过氧化物酶 1-20KU
3-羟基-2,4,6-三羟基苯甲酸 0.1-10mmol
磷酸盐缓冲液 1-500mmol
稳定剂 0.01-10%
防腐剂 0.01-10%。
6.根据权利要求4所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的试剂盒,每升试剂I溶液中各组分的含量为:
葡萄糖氧化酶 15KU
过氧化氢酶 2KU
抗坏血酸氧化酶 10KU
表面活性剂 0.05%
亚铁氰化钾 100umol
磷酸盐缓冲液 100mmol
稳定剂 0.05%
防腐剂 0.05%;
每升试剂II中各组分的含量为:
吡喃糖氧化酶 200KU
4-氨基安替比啉 5mmol
辣根过氧化物酶 10KU
3-羟基-2,4,6-三羟基苯甲酸 5mmol
磷酸盐缓冲液 400mmol
稳定剂 0.05%
防腐剂 0.05%。
7.根据权利要求1或2所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的方法,或根据权利要求4-6中任一项所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的试剂盒,其中所述的表面活性剂选自曲拉通X-100、B66、吐温20、十二烷基苯磺酸钠、甜菜碱、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或几种。
8.根据权利要求4-6中任一项所述的测定血液1,5-脱水葡萄糖醇含量的试剂盒,其中所述的稳定剂与防腐剂选自叠氮钠、叠氮锂、PC300、苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸丙酯、聚乙二醇、聚乙烯醇、乙二胺四乙酸二钠中的一种或几种。
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