[发明专利]一种乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及检验检测技术领域，具体涉及一种乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）自从1929年被报道可引起婴儿败血症到1980年以前，被认为是非典型的产黄色素的阴沟肠杆菌。1980年，FARMER和他的同事根据其DNA和生理生化特征，将其正式更名为阪崎肠杆菌，归类为肠杆菌属肠杆菌科的一个新种。

近年来，食品安全危象层出不穷，阪崎肠杆菌的致病性使其在乳制品细菌污染事件中最受瞩目。自1961年Uimeny和Franklin首次报道了新生儿脑膜炎之后，随后在全球范围内相继报道了一系列新生儿阪崎肠杆菌感染事件，惠氏婴儿配方奶粉、德国“美宝乐”、美国美赞臣、新西兰恒天然奶粉事件等。阪崎肠杆菌可能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，并且可引起神经系统后遗症和死亡，该菌感染引起的死亡率高达50%以上，2004年FAO/WHO在制定婴幼儿配方奶粉标准时，经过风险评估后，将阪崎肠杆菌与沙门氏菌列为婴幼儿配方奶粉的A类致病菌。

为了有效控制病原的发生和扩散，准确及时的检测手段是预防控制阪崎肠杆菌传播的关键。目前国内国际上检测乳制品阪崎肠杆菌都采用了预增菌、增菌、分离纯化、鉴定4个步骤，这样下来一个样品要4-7天才能出检测结果，耗费了大量的时间，而且需要检测人员准备和清洗、灭菌很多实验器皿，费时又费力。近年来，快速检测方法中的PCR方法、金标试纸法、酶联免疫法和特异性的显色生化鉴定技术等快速检测方法，已被应用到食品安全检测中来，使得阪崎肠杆菌检测技术有了很大的发展，然而使用这些快速检测技术必须经过长达2天的前增菌、增菌培养阶段，操作繁琐、限制了这些技术的推广和应用。因此，研究开发能快速实现阪崎肠杆菌选择性增菌的培养基具有十分重要的意义和应用价值。目前用来预增菌阪崎肠杆菌主要是无菌水和无菌缓冲蛋白胨水，之后再接种到肠道菌增菌肉汤、改良月桂基硫酸盐胰酪蛋白肉汤-万古霉素中进行选择性增菌，用了48小时的时间完成阪崎肠杆菌的选择性增菌，这样才能够实用快速的检测方法。

申请号为200910037189.0的中国专利申请公开了一种富集阪崎肠杆菌的试剂及其制备方法；申请号为201010165329.5的中国专利申请公开了一种快速检测筛选阪崎肠杆菌的方法，上述两个发明专利申请都是在样品中加入免疫磁珠与样品中的阪崎肠杆菌发生特异性结合以达到富集的目的，进而可以快速检测。两个发明均没有涉及到对样品中阪崎肠杆菌的增菌培养，而当样品中阪崎肠杆菌污染量很少时很容易导致阴性的检测结果。

发明内容

本发明的目的在于根据现有的阪崎肠杆菌检测中存在的当阪崎肠杆菌污染量很少时难以检测、检测时间长，步骤繁琐等问题，提供一种快速、定向、简便检测阪崎肠杆菌増菌剂。

本发明另一目的在于提供上述增菌剂的制备方法。

本发明还有一个目的在于提供上述增菌剂的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：

一种乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂，其组分为低聚己糖、蛋白胨、胆盐、SDS、丙酮酸钠和水。

上述増菌剂中，所述低聚己糖和蛋白胨可以弥补检测样本被稀释后中营养的不足，可以作为阪崎肠杆菌生长需要的碳源、氮源的补充。

胆盐和SDS可以有效抑制杂菌，特别是革兰氏阳性菌的生长。

作为一种优选方案，本发明乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂包括如下组分：低聚己糖2~10g，蛋白胨2~8g，胆盐1~5g，SDS0.05~0.5g，丙酮酸钠1~2.5g，水900mL。

更进一步地，上述增菌剂中，所述低聚己糖为低聚葡萄糖、低聚半乳糖或低聚果糖。

更进一步地，上述增菌剂中，所述蛋白胨为胰蛋白胨、酪蛋白胨、植物蛋白胨或多聚蛋白胨。

本发明乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂中，所述乳制品可以是消毒牛乳、酸牛乳、炼乳、乳粉、奶油、奶酪或乳清粉。

本发明乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂的制备方法包括如下步骤：

（1）将低聚己糖、蛋白胨、胆盐、SDS和丙酮酸加入到900mL水中混匀；

（2）灭菌。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤（2）中所述灭菌的温度为115℃，灭菌时间为20min。

本发明乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂可在常温下保存1天，使用前应预热至44℃。

本发明乳制品中阪崎肠杆菌的快速增菌剂可广泛应用于阪崎肠杆菌的分离或鉴定中。