[发明专利]鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、传染性法氏囊病三联灭活疫苗的生产方法

权利要求书

1.一种鸡新城疫、禽流感H9亚型、传染性法氏囊病三联灭活疫苗，其特征在于该疫苗主要成分是灭活的La Sota株鸡新城疫病毒、YBF003株禽流感病毒H9亚型和E.coliBL21/pET28a-VP2株大肠杆菌基因工程菌表达的传染性法氏囊病毒VP2蛋白和疫苗佐剂，其中YBF003株禽流感病毒H9亚型毒株已于2010年12月23日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所内中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.4503。

2.一种鸡新城疫、禽流感H9亚型、传染性法氏囊病三联灭活疫苗的生产方法，其特征在于：

(1)生产用菌毒种为La Sota株鸡新城疫病毒、YBF003株禽流感病毒H9亚型和表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21/pET28a-VP2株；

(2)分别按常规方法用鸡胚繁殖La Sota株鸡新城疫病毒和YBF003株禽流感病毒H9亚型，收获病毒液后经浓缩和灭活工艺制备成灭活病毒液；用加卡那霉素的LB液体培养基培养表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21/pET28a-VP2株，经过破菌、硫酸铵提取和灭菌工艺制备成表达的传染性法氏囊病毒VP2蛋白；

(3)将以上制备的三种灭活抗原混合后按常规方法制备灭活佐剂疫苗。

3.如权利要求2所述一种鸡新城疫、禽流感H9亚型、传染性法氏囊病三联灭活疫苗的生产方法，其特征在于三种灭活抗原等量混合，使0.1ml水相中鸡新城疫病毒含量不低于10^8.0EID₅₀，禽流感病毒含量不低于10^7.0EID₅₀；水相中传染性法氏囊病毒VP2蛋白效价按与鸡传染性法氏囊病毒标准阳性血清的琼扩效价计算不低于1∶16。