[发明专利]一种交替假单胞菌及其产右旋糖苷酶的方法与产品

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物，特别是一种分离自中国江苏省连云港海域的交替假单胞菌LP602（Pseudoalteromonassp. LP602）CGMCC N0.4319（已于2010年11月10日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为CGMCC N0.4319）；本发明还涉及该菌株产右旋糖苷酶的方法及其产品。

背景技术

右旋糖苷（Dextean）主要是α-1,6-糖苷键连接的葡萄糖。右旋糖苷酶（Dextranase,α-D-1,6-Glucan-6-D-Glucanohydrolase, EC3.2.1.11），又叫α-葡聚糖酶，是专一切割右旋糖苷中α-1,6糖苷键的水解酶。

目前国内外报道的产生右旋糖苷酶微生物主要为青霉（Penicilliumsp.）、斯达油脂酵母（Lipomyces starkeyi）、对角毛壳菌（Chaetomium gracile）、曲霉（Aspergillus ustus）、芽孢杆菌（Bacillus sp.）、链球菌（Streptococcus sp.）均能产生右旋糖苷酶。

右旋糖苷酶有很重要的应用价值，右旋糖苷酶在制糖工业中降解多糖聚合物，降低多糖的相对分子质量，从而降低糖的黏性。右旋糖苷酶还可以用于口腔医用制品和代血浆右旋糖苷的酶法生产。

右旋糖苷酶在口腔医用制品中的应用。口腔中的细菌发酵食物中的蔗糖，生成右旋糖苷（α-D-glucan）。右旋糖苷在牙齿面形成牙菌斑，它是导致细菌在牙齿表面积累的决定因素。菌斑中微生物则在网状结构保护下大量繁殖，其酸性代谢物破坏牙釉质，从而导致龋齿，造成无法再生的牙齿损伤，同时也给患者带来巨大痛苦。牙菌斑是龋齿和牙周病重要的致病因素之一。因此为了预防和控制龋齿和牙周病，抑制牙菌斑的发生和发展是至关重要的。

右旋糖苷由α-1,4、α-1,3、以及α-1,6糖苷键构成，其中α-1,6糖苷键形成的侧链决定其粘附性，而这种粘附性是形成菌斑和龋齿的重要物化因素。右旋糖苷通过其粘附性相互交联，形成保护性网状结构，使得其中微生物，特别是具有龋齿形成能力的链球菌非常容易滋生。

由于右旋糖苷在牙齿表面或缝隙中形成坚固的并具有一定韧性的菌斑结构，这种保护性结构使得具有龋齿形成能力的微生物很难根除，因此传统的牙刷、牙线等物理治疗方法难以杜绝龋齿损害。普通的化学口腔护理剂中通常含有硼酸、甲硝唑、西吡氯铵、氯己定、碘酒、乙醇等化合物，通常情况下以及口腔粘膜破损的情况下，这些物质可能会引起副反应，增加病人的痛苦。

右旋糖苷酶可以降解口腔中的右旋糖苷。右旋糖苷酶是一种生物制剂，使用和保存简便易行。无毒性，无耐药性，不影响口腔内的生物生态平衡，对不会刷牙的婴幼儿和不具备洗漱条件的情况下，是一种良好的预防牙龋齿斑的制剂。而每个人饭后，尤其是食糖后应用添加有此酶的漱口剂，是一项很好的抑制菌斑形成，预防龋齿和牙周病的有效措施。近几年各国在这一领域已作了深入研究，将具有降解菌齿斑能力的右旋糖苷酶添加到牙膏、漱口水和口香糖中，取得了良好的防治龋齿的效果。

右旋糖苷酶在代血浆右旋糖苷的酶法生产中的应用。右旋糖苷主要用作血浆增量剂，即代血浆。目前医药上用的右旋糖苷有中分子量和低分子量两种，中分子量限于70000左右，低分子量的为40000。目前，药用右旋糖苷的生产主要是采用酸水解法，条件激烈，得率低，要求生产设备条件苛刻，如能采用酶法生产，可提高产率，降低成本。

国外对这两个领域的研究与应用均有报道，但国内目前相关研究较少，经查新尚无海洋来源右旋糖苷酶应用于医学制品的相关专利。而且国外的右旋糖苷酶制品的生产菌株多为陆源的真菌，例如Lipomyces starkeyi等，其酶活性参数不甚理想。这是由于陆源的右旋糖苷酶最适温度较高，并且在比较温和的酸碱条件下发挥作用，不耐有机溶剂。而海洋来源的右旋糖苷酶可以在极端条件下发挥作用，例如低温、极端pH、高盐、有机溶剂，这为开发出更多新型海洋生物医用材料提供了最佳的条件。当今国内外对海洋微生物产右旋糖苷酶用于生物医学制品的开发研究尚未见报道。

虽然我国酶制剂市场增长较快，但是海洋来源酶制剂研究不足。我国酶制剂研究多集中在食品、工业、农业中，但是对于医药用酶研究不足。我国对于海洋来源的右旋糖苷酶的酶学性质研究以及工业化应用研究，尤其是在生物医学上的应用研究起步较晚。

发明内容