[发明专利]一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌及其微生物有机肥料

权利要求书

1.一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌，该菌株I-23属于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），保藏日期 2010年9月14日，保藏号为CGMCC NO.4159 ；

I-23的主要生物学特性为：革兰氏染色阳性G⁺，细胞为杆状，芽孢中生，过氧化氢酶阳性，淀粉水解阳性，V.P.反应阳性，甲基红试验阴性，纤维素分解阴性，明胶水解阳性，硝酸盐还原阳性，吲哚试验阳性，不能利用柠檬酸盐，能产氨，发酵葡萄糖产酸产气，发酵木糖、L-阿拉伯糖、甘露糖只产酸。

2.用权利要求1所述拮抗菌生产的防治马铃薯青枯病微生物有机肥。

3.根据权利要求2所述的微生物有机肥料，其特征在于：该肥料中拮抗菌和I-23含量在1×10⁸ cfu·g^-1以上、全氮质量比含量为4~5%，全氮中质量比90%以上为有机氮，总氮磷钾养分质量比为6~10%，有机质质量比含量为30~35%。

4.权利要求2或3所述微生物有机肥料的生产方法，包括：

1）将拮抗菌I-23接种到改良牛肉膏液体培养基，分别进行发酵生产，发酵生产的条件为：培养温度范围30~35℃，搅拌速度为180~300 rpm，发酵中后期形成芽孢，使发酵液中含菌或芽孢量≥1×10¹⁰ cfu·ml^-1；

2）将拮抗菌I-23与腐熟后的猪粪堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物进行固体发酵，每吨固体有机物料中加入拮抗菌液50L，固体发酵过程中每天翻堆1次，使固体发酵温度不超过50℃，一般发酵5天后结束，使拮抗菌含量达到1×10⁸ cfu·g^-1以上，获得含有拮抗菌I-23的微生物有机肥，将该种微生物有机肥在温度不超过60℃的条件下干燥至含水量低于30%，包装出厂即为防治马铃薯青枯病的微生物有机肥料，其中：

腐熟后的猪粪堆肥：发芽指数为98%以上，有机质质量比含量≥35%，有机氮质量比含量为1.2~2%，含水量质量比25~30%；

菜粕微生物酶解物的制备方法：将保藏号为CGMCC NO.1543的嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）菌株37-1发酵液加入到菜粕原料中，调节含水量55-65%和pH 6.0-7.5，进行开放式固体发酵，待发酵温度上升至50℃时立即开始翻堆，以后每天翻堆，使堆温始终维持在35-50℃共5天，固体发酵开始后，堆物的pH会不断上升，每次翻堆时用含酸液体调节含水量和pH，使它们分别维持在55-65%和6.0-7.0，发酵终止时再用含酸液体进行喷洒，直至堆物pH调整为5.0左右，再进行低温干燥或自然凉干，即为菜粕微生物酶解物；

腐熟的猪粪堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物制备方法：将腐熟的猪粪堆肥与菜粕微生物酶解物按体积比50~70%∶50~30%的比例充分混合，并后熟2-3天，后熟过程中翻堆2次。

5.根据权利要求4所述微生物有机肥料的生产方法，其中步骤1）所用改良牛肉膏培养液配制方法为：

牛肉膏2g、玉米粉5g、麸皮5g、土豆淀粉5g、NaCl 5g，定容至1000 ml，pH值调至7.2-7.4，121℃灭菌20 min。

6.权利要求2或3所述微生物有机肥料在防治马铃薯青枯病中的应用。