[发明专利]EV71疫苗制备方法及通过该方法制备的疫苗有效
| 申请号： | 201010607576.6 | 申请日： | 2010-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN102559615A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 沈琼;傅文彬;雷建强;张高峡 | 申请（专利权）人： | 上海泽润生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;C12N15/41;C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人： | 张广育;姜建成 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ev71 疫苗 制备 方法 通过 | ||
1.一种制备EV71重组病毒样颗粒的方法，该方法包括将EV71病毒P1前体蛋白编码基因与3CD蛋白酶编码基因克隆至毕赤酵母表达载体中，双表达后得到形态均一稳定且具有免疫原性的病毒样颗粒。
2.权利要求1的方法，其中所述P1前体蛋白编码基因的序列为SEQ ID NO：5，3CD蛋白酶编码基因的序列为SEQ ID NO：6。
3.权利要求1或2的方法，其中所述P1前体蛋白编码基因与3CD蛋白酶编码基因通过不同表达载体克隆至毕赤酵母表达载体中。
4.权利要求3的方法，其中所述不同表达载体包含不同强度的启动子。
5.权利要求4的方法，其中所述P1前体蛋白编码基因的表达载体为在pPICZαB载体的BstBI/KpnI位点插入SEQ ID NO：5所构成的重组载体，所述3CD蛋白酶编码基因的表达载体为在pPICZαB载体的BstBI/KpnI位点插入SEQ ID NO：6并将pAOX1启动子替换为pYPT1启动子所构成的重组载体。
6.通过前述权利要求任一项的方法制备的EV71重组病毒样颗粒。
7.一种疫苗，其包含权利要求6的EV71重组病毒样颗粒。
8.权利要求7的疫苗，还包含氢氧化铝佐剂。
9.权利要求6的EV71重组病毒样颗粒作为疫苗的用途。
10.一种DNA分子，其核苷酸序列为SEQ ID NO：5或SEQ IDNO：6。
11.一种重组载体，为包含权利要求10的核苷酸序列的pPICZαB载体。
12.权利要求11的重组载体，其中pAOX1启动子被替换为pYPT1启动子。
13.包含权利要求11或12的重组载体的毕赤酵母细胞。
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