[发明专利]陆英药材及其制剂中山奈素的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，特别涉及一种陆英药材及其制剂中山奈素的质量检测方法。

背景技术

陆英为忍冬科接木属植物陆英（Sambucus Chinensis Lindl.）的全草，又名接骨草、蒴藋、走马风等，是我国民间常用草药，有活血散瘀、祛风活络、发汗利尿等作用，主要用于跌打损伤、风湿、肾炎水肿、脚气水肿、肺炎、黄疸性肝炎等症。70年代末，江西宜春地区即创用陆英煎剂、糖浆、冲级治疗急性病毒性肝炎1115例，治愈率83.95%，有效率98.2%，明显优于同期中西药综合治疗对照组的效果。卫生部药品标准中药成方制剂第二册收载的陆英片、陆英糖浆和陆英冲剂用于急性病毒性肝炎的治疗。但陆英制剂质量标准低，无含量测定项，质量可控性较差，在一定程度上影响了陆英制剂的临床应用.

陆英中主要有效成分为熊果酸、齐墩果酸、黄酮等成分。现有文献报道最多的是有关熊果酸和齐墩果酸的含量测定方法，由于熊果酸和齐墩果酸结构相似，两者分离度较差，分析结果差异大。廖琼峰等人报道了陆英中绿原酸的含量测定方法；专利申请号为“200610023189.1”的中药陆英颗粒有效成分及含量的测定方法，该专利公开了采用高效液相色谱法测定多肽类成分含量的方法。由于绿原酸和多肽类成分并非陆英中的主要成分，对它们的含量进行控制针对性不强。黄酮类成分是陆英主要成分之一，黄酮类成分含量高低能够较好反映陆英药材及其制剂的质量。汪玢等人报道了采用紫外分光光度法测定以芦丁计总黄酮含量的方法，由于显色反应干扰因素多，该方法专属性较差，测定结果差异较大；同时申请人经过研究发现，陆英中主要黄酮苷元为山奈素。

发明内容

本发明的目的在于提供一种陆英药材及其制剂的质量检测方法，该方法先将样品中的黄酮苷酸水解成苷元山奈素，再采用高效液相色谱法测定山奈素的含量，目的在于控制陆英药材及其制剂的质量。

本发明陆英药材及其制剂中山奈素的质量检测方法内容如下：

色谱条件  采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—酸水溶液（35~60:65~40）为流动相，流速为0.8~1.5ml/min，柱温10~40℃，检测波长为367±2nm，理论板数按山柰素计算应不低于4000；

对照品溶液的制备  取山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1.0~15.0μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取样品2~40重量份，精密称定，精密加入40~100%甲醇或乙醇40~240重量份，称定重量，超声或回流提取0.5~2小时，冷却，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液5~15重量份，加入酸水2~8重量份，80~100℃水浴加热0.5~1.5小时，冷却，定容至25重量份，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，即得。每毫升供试品溶液相当于原药材0.1~0.5g；

测定法  取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

其中，优选的色谱条件为采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—0.4％磷酸溶液（45:55）为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃，检测波长为367nm，理论板数按山柰素计算应不低于4000。

其中，供试品溶液制备过程，酸水解所采用酸水是浓度为5~35%的盐酸、硫酸或磷酸水溶液中的任一种。

其中，陆英药材供试品溶液优选制备方法为：取陆英药材粉末20g，精密称定，精密加入75%乙醇120ml，称定重量，回流提取2小时，冷却，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液15ml，加入15%盐酸水溶液5ml，80℃水浴加热0.5小时，冷却，定容至25ml，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，即得。

其中，陆英片供试品溶液优选制备方法为：取陆英片，除去包衣，研细，取3g，精密称定，精密加入75%乙醇60ml，称定重量，超声提取0.5小时，冷却，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液10ml，加入15%盐酸水溶液3ml，80℃水浴加热0.5小时，冷却，定容至25ml，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，即得。

其中，陆英颗粒供试品溶液优选制备方法为：取陆英颗粒，研细，取30g，精密称定，精密加入75%乙醇120ml，称定重量，超声提取0.5小时，冷却，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液15ml，加入15%盐酸水溶液5ml，80℃水浴加热0.5小时，冷却，定容至25ml，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，即得。