[发明专利]一种纤维堆囊菌高密度发酵与埃博霉素产物分离偶联的生产工艺

权利要求书

1.一种纤维堆囊菌高密度发酵与埃博霉素产物分离偶联的生产工艺，其特征在于：通过流加工艺，包括碳氮源物质和前体物质，实现纤维堆囊菌的高密度发酵；同时使用可以多次循环利用的吸附树脂，实现埃博霉素产物分离，并将高密度发酵与产物分离偶联。

2.如权利要求1所述的流加工艺，其特征在于从发酵开始后的第30-70h补加浓度为2g/L的葡萄糖，每小时流加原始发酵液体积的0.01-0.1％。从发酵过程中的第70-120h添加前体营养物质混合液。该混合液放入发酵罐补料瓶内，灭菌后采用蠕动泵自动流加，每小时流加原始发酵液体积的0.01-0.05％。

如2所述的前体物质混合液配方为：苏氨酸5mg/L、丝氨酸(Ser)5mg/L、蛋氨酸和半胱氨酸各2mg/L、乙酸钠20mg/L、丙酮酸30mg/L、VB₁₂1mg/L、玉米浆2g/L。葡萄糖和前体物质混合液使用前用去离子水配制，121℃灭菌20min使用。

3.如权利要求1所述的发酵和产物分离偶联工艺，其特征在于：通过与发酵偶联的吸附树脂柱连续吸附发酵液中的埃博霉素，具体工艺流程为：

发酵液→蠕动泵→树脂柱→发酵液回流至发酵罐。

如3所述的吸附树脂用量为原始发酵液体积的0.5-3％；使用前树脂柱及管路要灭菌，树脂柱启用时间为发酵开始后的第48小时，发酵液循环速度为每分钟10-100mL，循环吸附72h更换树脂柱，2-4个树脂柱轮流使用，当树脂吸附72h后，通过树脂体积6-10倍的甲醇洗脱收集埃博霉素，并用6-10倍的去离子水依次洗涤树脂，实现树脂再生，灭菌后继续循环使用。

4.如权利要求1所述的一种纤维堆囊菌高密度发酵与埃博霉素产物分离偶联的生产工艺在纤维堆囊菌发酵生产埃博霉素类化合物方面的应用。