[发明专利]一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法

权利要求书

1.一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）外植体预处理：将甘蔗截成双芽茎段，用75%酒精擦拭干净，新洁尔灭浸泡2-3分钟后，经50~55℃热水处理25~35分钟后置于基本培养基中于人工气候箱内高温催芽，或置于温室细河沙培养1周后，作为所用的外植体；

（2）外植体采集：将上述经过预处理后萌发的茎尖顶芽在无菌条件下摘取1~2mm的茎尖组织，利用滤纸桥的培养方式，接种在茎尖诱导培养基上，诱导其萌发芽点；

（3）分化培养：将步骤（2）萌发的芽接种在分化培养基上，分化出大量的丛芽；

（4）壮苗培养：将步骤（3）分化出的丛芽置于壮苗培养基上，培养一个周期，获得健壮的丛芽；

（5）生根培养：将步骤（4）经过壮苗的丛芽切成单株接种在生根培养基中进行生根培养；

（6）移栽：当步骤（5）的生根苗长至3~5cm，根数5条以上时，移栽到室外。

2.根据权利要求1所述的一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的基本培养基各组分及其含量为：

基本培养基：MS培养基和蔗糖25~35g/L， PH值为5.8~6.2。

3.根据权利要求1所述的一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的茎尖诱导培养基各组分及其含量和诱导培养方式为：

茎尖诱导培养基：MS培养基、吲哚丁酸IBA0.01~0.03mg/L和活性炭0.8~1.2g/L。

4.根据权利要求1所述的一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的分化培养基各组分及其含量为：

分化培养基：MS培养基、6-苄氨基嘌呤6-BA0.1~0.8mg/L和吲哚丁酸IBA0.01~0.03mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的壮苗培养基各组分及其含量为：

壮苗培养基：MS培养基、蛋白胨0.1~0.3 g/L 和酵母0.1~0.3 g/L。

6.根据权利要求1所述的一种糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的生根培养基各组分及其含量为：

生根培养基：MS培养基、吲哚丁酸IBA0.1~0.3mg/L、萘乙酸NAA0.1~0.3mg/L和蔗糖40~60g/L。

7.根据权利要求1所述的糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的外植体预处理与灭菌分别是：

预处理：将糖蔗按照双芽截成段→用75%酒精和新洁尔灭菌预处理→经50~55℃热水处理25~35分钟后→置于人工气候箱内高温催芽，或置于温室细河沙培养1周后，作为所用的外植体；灭菌：用75%酒精浸泡0.5~1.0min后，用0.1%升汞处理3~5分钟，无菌水冲洗3~5次。

8.根据权利要求1所述的糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：步骤（2）所述的茎尖诱导培养方式为液体滤纸桥培养。

9.根据权利要求1或7所述的糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的高温催芽的温度为35~40℃。

10.根据权利要求1或7所述的糖蔗茎尖组培脱毒快繁的方法，其特征在于：所述的高温催芽的培养周期为1周。