[发明专利]一种荧光量子点标记的壳聚糖DNA纳米复合载体及其制备和应用有效
申请号: | 201010598079.4 | 申请日: | 2010-12-21 |
公开(公告)号: | CN102121030A | 公开(公告)日: | 2011-07-13 |
发明(设计)人: | 陈介南;王琼;卢孟柱 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/87 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 颜勇 |
地址: | 410000 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 量子 标记 聚糖 dna 纳米 复合 载体 及其 制备 应用 | ||
1.一种荧光量子点标记的壳聚糖DNA纳米复合载体,其特征在于,所述的复合载体是以壳聚糖与DNA载体的结合物为中心,周围包覆荧光量子点的复合物。
2.根据权利要求1所述的复合载体,其特征在于,所述的荧光量子点包括CdSe、CdS或ZnSe量子点。
3.一种荧光量子点标记的壳聚糖DNA纳米复合载体的制备方法,其特征在于,先将壳聚糖和DNA载体制备成壳聚糖DNA载体,再加入CdSe、CdS或ZnSe量子点混匀,过滤即可。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,将等体积的壳聚糖和溶于5mM硫酸钠中的DNA溶液分别在55℃预热30分钟,旋涡混匀仪混合30秒,形成壳聚糖DNA载体;加入100uL,0.5mM的CdSe量子点到载体溶液中,旋涡混匀2分钟,超滤分离除去未反应的量子点,并用0.22um微孔滤膜的过滤灭菌器进行过滤,得到复合载体。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的壳聚糖的分子量范围为10-30万,在pH为5.5的5mM醋酸钠溶液中完全溶解,浓度为200ug/mL;所述的溶于5mM硫酸钠中的DNA溶液浓度为80ug/mL。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的CdSe量子点的制备方法:是以1.5mM的L-半胱氨酸为稳定剂在水相中合成,水浴温度30℃,水浴时间90min,L-Cys∶Cd∶Se为摩尔比3∶2∶1,pH值为8。
7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的DNA载体为pEGAD质粒或pBI121质粒。
8.权利要求3或4或5或6或7制备得到的荧光量子点标记的壳聚糖DNA纳米复合载体应用于植物转基因。
9.权利要求3或4或5或6或7制备得到的荧光量子点标记的壳聚糖DNA纳米复合载体应用于麻疯树转基因。
10.根据权利要求9所述的应用方法,其特征在于,将麻疯树愈伤组织在30mL新鲜培养基中培养一个星期;然后所述的复合载体加入到1mL的含松散愈伤组织的受体溶液,超声波处理6分钟,超声功率200W,经过2天共培养,完成转导。
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