[发明专利]一种抗凝血鼠药大隆分子印迹聚合物及其作为固相萃取剂的应用

权利要求书

1.一种抗凝血鼠药大隆分子印迹聚合物，其特征在于其制备方法为：

1)采用大隆作为模版分子，同功能单体在溶剂中混匀，混匀后在4℃以下保存24h形成预聚体；然后在常温下加入交联剂和引发剂，在4℃以下、用波长为260nm的紫外光引发聚合24h，得到球形颗粒聚合物；功能单体为丙烯酰胺，溶剂为二甲基亚砜；交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯TRIM，引发剂为偶氮二异丁腈；功能单体、大隆和溶剂的摩尔比为4∶1∶20；交联剂的体积用量为溶剂的1.6％，引发剂的摩尔用量为模版分子的4％；

2)用有机溶剂甲醇/乙酸浸泡步骤1)得到的球形颗粒聚合物并搅拌2h，球形颗粒聚合物中的模板分子溶解在有机溶剂甲醇/乙酸中，然后离心分离去除有机溶剂甲醇和乙酸；甲醇与乙酸的体积比为9∶1；

3)重复步骤2)2次以上；

4)经步骤3)清洗后的球形颗粒聚合物中加入乙醇，洗涤除去乙酸；

5)重复步骤4)2次以上；

6)经步骤5)清洗后的球形颗粒聚合物中加入丙酮，以除去细小颗粒，然后真空干燥，得到苯巴比妥分子印迹聚合物。

2.一种大隆分子印迹聚合物作为固相萃取剂的应用，其特征在于具体步骤为：

1)大隆分子印迹固相萃取柱的制备：

将制备的大隆分子印迹聚合物溶于甲醇中，搅拌均匀后缓慢注入带有20μm筛板的聚乙烯空固相萃取柱中，真空抽吸使大隆分子印迹聚合物在空固相萃取柱中分布均匀，然后在大隆分子印迹聚合物上方装入20μm筛板，大隆分子印迹聚合物与甲醇的比50mg∶5mL；

2)制备样品：

取血液1mL，用2mL乙腈沉淀混悬后，用8mL去离子水稀释，离心，取清液；

3)大隆分子印迹固相萃取方法：

依次用1mL甲醇、1mL甲醇/水混合溶剂活化大隆分子印迹固相萃取柱，然后将步骤2)制备的样品上固相萃取柱，然后再用2mL甲醇/水混合溶剂洗涤，最后用2mL甲醇/甲酸混合溶剂洗脱，收集洗脱液，在空气流下挥干，然后用200μL的甲醇溶解残渣，过液相专用滤膜后，LC、LC-MS分析；

甲醇/水的体积比为3∶7，甲醇/甲酸的体积比为9∶1。