[发明专利]一种植物中总核酸的同步提取方法

权利要求书

1.一种植物中总核酸的同步提取方法，其特征在于将生物材料粉碎后与2％CTAB裂解液混合，65℃水浴45-60min，加入与所述的2％CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，上下颠倒混匀；离心，取上清，加入与上清液等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，上下颠倒混匀；离心，取上清，加入1/30上清液体积的NaAc和1/10上清液体积的无水乙醇，上下颠倒混匀，在冰上静置5min后，再加入与上清液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10上清液体积的NaAc和两倍上清液体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，室温干燥，得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。

2.根据权利要求1所述的植物中总核酸的同步提取方法，其特征在于所述的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂中氯仿和异戊醇的体积比为20～30∶1，优选24∶1。

3.根据权利要求1所述的植物中总核酸的同步提取方法，其特征在于所述的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂中水饱和酚、氯仿及异戊醇的体积比为20～28∶20～28∶1，优选25∶24∶1。

4.根据权利要求1所述的植物中总核酸的同步提取方法，其特征在于所述的生物材料粉碎是通过在液氮中将生物材料研磨成粉末，所述的离心条件为8000～12000rpm，8～15分钟。

5.一种植物中基因组DNA的提取方法，其特征在于包括如下步骤：

1)按照权利要求1中任一项所述的方法提取植物中的总核酸；

2)取步骤(1)提取的总核酸，按照常规方法进行RNA的消化，得到所述的基因组DNA。

6.根据权利要求5所述的植物中基因组DNA的提取方法，其特征在于所述的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂中氯仿和异戊醇的体积比为20～30∶1，优选24∶1；所述的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂中水饱和酚、氯仿及异戊醇的体积比为20～28∶20～28∶1，优选25∶24∶1。

7.根据权利要求5所述的植物中基因组DNA的提取方法，其特征在于所述的生物材料粉碎是通过在液氮中将生物材料研磨成粉末；所述的离心条件为8000～12000rpm，8～15分钟。

8.一种植物中总RNA的提取方法，其特征在于包括如下步骤：

1)按照权利要求1中任一项所述的方法提取植物中的总核酸；

2)取步骤(1)提取的总核酸，按照常规方法进行DNA的消化，得到所述的总RNA。

9.根据权利要求8所述的植物中总RNA的提取方法，其特征在于所述的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂中氯仿和异戊醇的体积比为20～30∶1，优选24∶1；所述的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂中水饱和酚、氯仿及异戊醇的体积比为20～28∶20～28∶1，优选25∶24∶1。

10.根据权利要求8所述的植物中总RNA的提取方法，其特征在于所述的生物材料粉碎是通过在液氮中将生物材料研磨成粉末，所述的离心条件为8000～12000rpm，8～15分钟。