[发明专利]一种防治桃红颈天牛的大型真菌杀虫剂无效
申请号: | 201010579945.5 | 申请日: | 2010-12-09 |
公开(公告)号: | CN102090422A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
发明(设计)人: | 杨绍斌;韩俊艳;王军 | 申请(专利权)人: | 沈阳大学 |
主分类号: | A01N65/00 | 分类号: | A01N65/00;A01P7/04 |
代理公司: | 沈阳东大专利代理有限公司 21109 | 代理人: | 戚羽 |
地址: | 110044 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防治 桃红 天牛 大型 真菌 杀虫剂 | ||
1.一种防治桃红颈天牛的大型真菌杀虫剂,其特征是:其组分及含量为:40%褐鳞环柄菇毒肽类毒素粗品,35%条纹毒鹅膏菌毒肽类毒素粗品和25%10目的菌糠粉。
2.根据权利要求1所述的一种防治桃红颈天牛的大型真菌杀虫剂,其特征是:其制备方法为:(1)、大型真菌的筛选:从大型真菌中筛选含有毒肽类毒素的褐鳞环柄菇和条纹毒鹅膏菌母种试管各1支;(2)、摇床液体深层发酵:①、液体培养基:马铃薯200克、葡萄糖20克、NaNO33克、KH2PO41克、KCl0.5克、MgSO4·7H2O0.05克、FeSO40.01克、蒸馏水1000毫升、PH7.0;②取两个容量为1000毫升的三角瓶,贴上标签,标明A瓶、B瓶,然后分别向A瓶、B瓶中加入液体培养基500毫升;在121℃~126℃、0.1兆帕下灭菌15~20分钟;③接种:在超净工作台上操作;首先用移液管分别取5毫升无菌水加入到褐鳞环柄菇和条纹毒鹅膏菌母种试管种中,随后用接种针在试管斜面上刮取菌落,洗脱菌丝制成褐鳞环柄菇和条纹毒鹅膏菌菌悬液各5.5毫升,然后将褐鳞环柄菇菌悬液倒入A瓶中,将条纹毒鹅膏菌菌悬液倒入B瓶中;④摇床液体深层发酵:将A瓶褐鳞环柄菇菌悬液和B瓶条纹毒鹅膏菌菌悬液置于摇床上,在温度26~28℃、转速110转/分钟的条件下深层发酵7~10天;(3)、超声破碎、冷冻离心处理发酵液:将A瓶褐鳞环柄菇发酵液和B瓶条纹毒鹅膏菌发酵液分别用JY99-2D超声波细胞粉碎机,在功率200瓦,工作间歇1秒/1秒的条件下对菌丝和细胞进行破碎处理,再以10000转/分钟冷冻离心,分离上清液,滤渣用1~3倍量无菌水清洗三次,最后合并上清液,弃去残渣,A瓶褐鳞环柄菇发酵液离心得上清液486毫升;B瓶条纹毒鹅膏菌发酵液离心得上清液483毫升;(4)、毒肽类毒素粗品的提取:首先向486毫升褐鳞环柄菇的上清液和483毫升条纹毒鹅膏菌的上清液中分别加5~8倍量95%甲醇,在室温下充分搅拌1~3小时,然后在50~60℃下用旋转蒸发仪加热减压浓缩,结果得褐鳞环柄菇的毒肽类毒素粗品18.4克,回收率3.8%;条纹毒鹅膏菌的毒肽类毒素粗品20.2克,回收率4.2%;(5)、载体的选择与处理:载体选用袋料栽培香菇的废料菌糠;首先将菌糠烘干粉碎,然后过筛成10目的菌糠粉备用;(6)、成型:首先按40%、35%依次称取褐鳞环柄菇和条纹毒鹅膏菌的毒肽类毒素粗品,然后混合均匀,最后添加25% 10目的菌糠粉作载体进行充分搅拌,待均匀后即成白色粉状大型真菌杀虫剂。
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