[发明专利]与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物及其应用

权利要求书

1.与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物，其特征在于，所述标记引物的核苷酸序列为： 

标记引物Xbarc5， 

P1：5’-GCGCCTGGACCGGTTTTCTATTTT-3’，

P2：5’-GCGTTGGGAATTCCTGAACATTTT -3’，

或者标记引物Xgwm312，     

P3：5’-ATCGCATGATGCACGTAGAG -3’， 

P4：5’-ACATGCATGCCTACCTAATGG -3’。

2.根据权利要求1所述的标记引物，其特征在于，所述标记引物在遗传图谱上的顺序为Xbarc5、PmHNK54、 Xgwm312，所述标记引物Xbarc5与基因PmHNK54的遗传距离为5.0cM，所述标记引物Xgwm312与PmHNK54的遗传距离为6.0 cM。

3.一种权利要求1所述的与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物的用法，其特征在于，将所述标记引物用于SSR标记筛选时的反应程序为：

(1) PCR反应：PCR反应体系为10μl，含10×buffer 1μl，10 mM/μl dNTP 0.2μL，20 uM/μL 引物 0.2μl，5 U/ul Taq 酶 0.1ul，去离子水 8.1 μl，20 ng/μl 基因组DNA 0.4 μl；

 (2) 扩增程序为：94℃ 预变性 3 min，94℃变性1 min，55℃或60℃复性1 min，72℃延伸 2 min, 40个循环；72℃延伸10 min；

 (3) 扩增产物用6%变性聚丙烯酰胺凝胶或8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色后观察照相。

4.权利要求1或2所述的与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物在辅助育种中的应用。