[发明专利]含斜带石斑鱼促性腺激素Ⅰ成熟肽基因的真核表达载体、重组菌株和重组蛋白及其应用

权利要求书

1.一种克隆载体，其特征是：含有斜带石斑鱼促性腺激素GTHα或FSHβ成熟肽基因。

2.一种克隆载体，其特征是：由含有斜带石斑鱼促性腺激素GTHα或FSHβ的成熟肽基因和大肠杆菌构建制得pPTZ 57R/T-GTHα或pPTZ 57R/T-FSHβ。

3.一种重组菌株，其特征是：由克隆载体pPTZ 57R/T-GTHα或pPTZ 57R/T-FSHβ转化大肠杆菌DH5α构建制得pPTZ 57R/T-GTHα-DH5α或pPTZ 57R/T-FSHβ-DH5α。

4.一种真核表达载体，其特征是：含有斜带石斑鱼促性腺激素GTHα和/或FSHβ成熟肽基因。

5.一种真核表达载体，其特征是：由含有斜带石斑鱼促性腺激素GTHα和/或FSHβ的成熟肽基因与毕赤酵母pPICZαA构建而得的pPICZαA-GTHαh、pPICZαA-FSHβh、pPICZαA-F SHβhm、pPICZαA-F SHβαh。

6.一种重组菌株，其特征是：由真核表达载体pPICZαA-GTHαh、pPICZαA-FSHβh、pPICZαA-FSHβαh、pPICZαA-GTHαh与pPICZαA-FSHβhm转化毕赤酵母X33构建制成的pPICZαA-GTHαh-X33、pPICZαA-F SHβh-X33、pPICZαA-F SH(β-α)h-X33与pPICZαA-F SH(β+α)hm-X33。

7.一种重组促性腺激素成熟肽基因的制备方法，其特征是：将真核表达载体pPICZαA-GTHαh、pPICZαA-F SHβh、pPICZαA-F SHβαh、pPICZαA-GTHαh与pPICZαA-F SHβhm分别转化的寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得相应的重组rGTHα、rFSHβ、rFSH(β-α)与rFSH(β+α)成熟肽基因。

8.根据权利要求7所述的重组促性腺激素成熟肽基因的制备方法，其特征是：所述的重组成熟肽基因需经纯化处理，所述的纯化处理过程是：利用硫酸铵沉淀的方法沉淀总蛋白，然后利用镍柱亲和层析分离纯化目的蛋白，镍柱亲和层析采用Tris-HCl pH7.9缓冲系统，缓冲系统中洗脱缓冲液咪唑浓度为100mM，最后利用脱盐柱脱盐以除去蛋白中残留的咪唑与其它盐类，经分离纯化后得到纯化的重组蛋白产品。

9.一种重组促性腺激素成熟肽基因，其特征是：由真核表达载体pPICZαA-GTHαh、pPICZαA-FSHβh、pPICZαA-FSHβαh、pPICZαA-GTHαh与pPICZαA-FSHβhm分别转化的寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得相应的重组rGTHα、rFSHβ、rFSH(β-α)、rFSH(β+α)成熟肽基因的制备方法制备获得。

10.权利要求9所述的重组促性腺激素成熟肽基因在制备鱼类催产剂中的应用。