[发明专利]一种烟草多酚氧化酶的分离技术无效
| 申请号： | 201010571817.6 | 申请日： | 2010-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN102477413A | 公开（公告）日： | 2012-05-30 |
| 发明（设计）人： | 张晓雷 | 申请（专利权）人： | 张晓雷 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 221300 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 烟草 氧化酶 分离 技术 | ||
【权利要求书】：
1.一种烟草多酚氧化酶的分离技术，其特征是：该技术包括如下步骤：
(1)粗酶液的提取，将新鲜烟叶切碎，在4℃条件下匀浆，加入冷丙酮和水，在-18℃条件下保存24h；
(2)将步骤(1)经4层纱布过滤，用150ml冷丙酮洗涤3次，室温下干燥2h后冷冻备用；
(3)在上述丙酮干粉中加入200ml的磷酸缓冲液，PH值为6.5，超声波处理1h，离心，上清液中加入30％摩尔浓度的硫酸铵，4℃条件下搅拌4h后离心，取上清液，取80％摩尔浓度的硫酸铵，4℃条件下搅拌24h后离心；
(4)将上述溶液进行层析分离，其中多酚氧化酶经透析袋脱盐浓缩后，在-18℃条件下保存备用。
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