[发明专利]阿霉素脂质体及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及阿霉素脂质体及其制备方法，该制备方法能使脂质体制备过程中乙醇含量得到控制，且确保制备过程中残留的乙醇对脂质体性质无显著性影响。

背景技术：

阿霉素（Doxorubicin）是一种常见的经典抗生素类广谱抗肿瘤药物，其作用机制主要是通过影响拓扑异构酶Ⅱ的活性，抑制RNA 和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用。阿霉素是一广谱抗肿瘤药，临床上用于治疗急性淋巴细胞白血病、急性粒细胞性白血病、何杰金和非何杰金淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、软组织肉瘤、成骨肉瘤、横纹肌肉瘤、肾母细胞瘤、神经母细胞瘤、膀胱瘤、甲状腺瘤、绒毛膜上皮癌、前列腺癌、睾丸癌、胃癌、肝癌等。阿霉素能够通过血-神经屏障（blood-nerve barrier）而损害神经节细胞。其他主要的毒性反应包括，白细胞和血小板减少、毛发脱落、心脏毒性、恶心、食欲减退；特别是当药物溢出血管外可引起组织溃疡及坏死。所有这些问题均可以制备脂质体解决。

一般而言，脂质体是由磷脂分子悬浮在水溶液中聚集形成的，磷脂膜为对称双分子膜，分子间为弱相互作用(疏水相互作用、范德华力、氢键等)，磷脂分子间排列紧密, 碳氢链高度有序, 膜流动性小，但常因温度、pH值和含水量等因素的变化发生相变和相分离。当发生凝胶相→液晶相相变，膜分子间隔加大，流动性和通透性显著增加；当发生凝胶相→六角相相分离, 膜上形成孔洞或发生膜融合, 所载药物迅速渗漏。在制备脂质体时，常常采用乙醇作为溶媒溶解脂质，乙醇能诱导流动磷脂的酰基链无序化，也形成一个交错凝胶相，它使脂质膜的离子半径、分子间范德华力、静电力大小发生变化，对膜的结构有一定的影响。

远距离来说，脂质体间存在范德华力和静电排斥力；当两表面接触很近时，1-3nm，脂质体间存在水合力，一种强烈的排斥力，超过范德华力和静电斥力成为主导作用。水合力是水分子与磷脂的亲水基团作用，可阻止脂质体膜间的聚集。当有高浓度乙醇存在时，水分子就被乙醇分子取代，其吸附于膜表面，或者分布在膜的疏水区。这种取代使脂质体表面的水合层消失，引起DPPC（二棕榈酰磷脂酰胆碱）脂质体的聚集。

基于乙醇可引起侧向相分离，导致卵磷脂/磷脂酰乙醇胺脂质体膜的渗透性增加，过多的乙醇易造成脂质体的聚集、双分子层融合以及药物的渗漏，从而影响脂质体的包封率，粒径及稳定性等。因此已有的阿霉素脂质体（DOXIL，凯莱）商品中乙醇残留量要求小于0.01%。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种阿霉素脂质体及其制备方法。

基于乙醇毒性低，对脂质体膜材溶解性好方面考虑，我们以改良乙醇注入法制备空白脂质体，采用离子梯度装载技术制备阿霉素脂质体。考察不同乙醇含量对空白脂质体、梯度脂质体及载药脂质体包封率、粒径及抗肿瘤效率的影响，惊喜地发现最终脂质体制剂的乙醇残留量可以控制在10%（v/v）以内，确保制备过程中残留的乙醇对脂质体性质无显著性影响，极大地缩短简化工业生产中的乙醇含量控制提供参考。由此我们建立改良乙醇注入法制备阿霉素脂质体的制备工艺，具体方法如下：配制水化介质于45~75 ℃保温待用；以制剂产品终体积百分比小于10%的乙醇，包括无水乙醇，于45~75 ℃溶解脂质相；将水化介质按照一定速度加入至脂质相中，搅拌分散，降低粒径，得空白脂质体；按照梯度载药法即可。

其处方及制备工艺如下：

阿霉素                    0.5%～40%

磷脂类物质                10%～90%

胆固醇                    0%～44.5%

PEG脂质衍生物             0%～40%