[发明专利]人绒毛膜促性腺激素的纯化方法

权利要求书

1.一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：

(1)将人绒毛膜促性腺激素粗品溶解于pH值为4～5的0.05mol/L醋酸钠缓冲液后，加到载体为琼脂糖、葡聚糖凝胶或羟磷酸钙的羧甲基阳离子交换层析柱上，以pH值为4～5的包含0.05mol/L醋酸钠和0.2～0.5mol/L氯化钠的缓冲液洗脱，收集270～290nm，优选为280nm下光密度为0.6～0.7的洗脱液；

(2)将洗脱液脱盐浓缩；

(3)再加到载体为琼脂糖、葡聚糖凝胶或羟磷酸钙的羧甲基阳离子交换层析柱上，以pH值为5.5～6.5的0.05～0.1mol/L醋酸钠缓冲液洗脱，收集270～290nm，优选为280nm下光密度为0.6～0.7的洗脱液。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，以pH值为4～5的包含0.05mol/L醋酸钠和0.2～0.5mol/L氯化钠的缓冲液洗脱之前以pH值为4～5的0.05mol/L醋酸钠缓冲液进行洗涤。

3.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，所述脱盐浓缩利用超滤膜，优选为截留分子量为1万的超滤膜进行。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的纯化方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，所述洗脱液被脱盐浓缩至其电导率与pH值为4～5的0.05mol/L醋酸钠缓冲液的电导率相等时为止。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的纯化方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，在被加到羧甲基阳离子交换层析柱前，先将脱盐浓缩的洗脱液的pH值和电导率调节至与pH值为5.5～6.5的0.05～0.1mol/L醋酸钠的缓冲液的pH值和电导率相等。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的纯化方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)和/或(3)在0～15℃下进行。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法还包括向步骤(3)获得的洗脱液中加入乙醇进行沉淀。

8.根据权利要求7所述的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法还包括将沉淀进行脱水和真空干燥。

9.根据权利要求8所述的纯化方法，其特征在于，所述脱水采用无水乙醇进行；所述真空干燥为在五氧化二磷存在下的真空干燥。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法还包括采用磷酸钙除去纯化的人绒毛膜促性腺激素中的热原。