[发明专利]一种高产β-葡萄糖苷酶产香酵母及在无醇苹果饮料的应用

权利要求书

1.一株高产β-葡萄糖苷酶的产香酵母，保藏号为CGMCC NO.4343。能产生高活性的β-葡萄糖苷酶，主要用于发酵低醇苹果汁并增加无醇苹果饮料的香气。

产香酵母的特征：

(1)细胞为椭圆形，直径5-10微米，长宽比为1-1.5，芽殖；

(2)产β-葡萄糖苷酶的活性达到11.46U/ml；

(3)在发酵培养基中发酵4天后酒精度低于0.5％，具有稳定的发酵性能；

(4)发酵苹果汁后的香气更浓郁。

2.如权利要求1所述的产香酵母，其特征为产香酵母从酿酒企业中的废酒液中分离、经过筛选分离成为纯培养物的方法是：

(1)将废酒液以无菌水稀释成10^-1至10^-6不同的梯度，涂布在初筛培养基上，于28℃下培养3天，挑取平板上周围呈黑色的菌落为产β-葡萄糖苷酶的菌株，分别将每株菌划线分离纯化得到纯菌落。

(2)将初筛所得菌株在产酶培养基中28℃下摇床培养2-3天，通过p-NPG比色法测β-葡萄糖苷酶酶活得到酶活最高的菌株。

(3)将得到的酶活力最高的菌株接种到麦汁琼脂培养基上保藏。

3.如权利要求2所述的筛选方法(1)所使用的初筛培养基所含组分为：

葡萄糖1～5％，酵母膏0.5～3％，蛋白胨1～3％，青霉素0.01～0.05％，七叶苷0.2～0.5％，氯化铁0.02～0.08％，琼脂1.5～2％。

4.如权利要求2所述的筛选方法(1)所使用的初筛培养基所含组分优选为：

葡萄糖2％，酵母膏1％，蛋白胨2％，青霉素0.01％，七叶苷0.3％，氯化铁0.05％，琼脂2％。

5.如权利要求2所述的筛选方法(2)所使用的产酶培养基所含组分为：

葡萄糖2％，酵母膏1％，蛋白胨2％。

6.一种发酵增香型低醇或无醇苹果饮料的制备方法，其特征为：

以浓缩苹果汁为原料，以产香酵母为发酵增香的酿造工艺，工艺流程为浓缩果汁的稀释、产香酵母发酵、饮料的过滤及澄清、成品无醇苹果饮料。主要包括以下工艺步骤：

A、浓缩苹果汁经稀释8至10倍后进行发酵。

B、发酵温度控制在16-18℃下纯种低温发酵，无菌状态接种。

C、将发酵后的饮料加入壳聚糖进行澄清及过滤、最后经孔径为0.45μm的膜过滤掉微生物后成品。

7.如权利要求5所述的发酵增香型无醇或低醇苹果饮料，在使用浓缩苹果汁稀释8倍后，经过该产香酵母在18℃下纯种低温发酵后，酒精度低于0.5％，总酯含量大于38.37mg/L。香气浓郁。

8.如权利要求5所述的发酵增香型无醇或低醇苹果饮料生产方法，可用于生产加气型或起泡型苹果饮料用途。