[发明专利]酵母细胞中硒化镉量子点提取、纯化方法有效

专利信息
申请号: 201010562410.7 申请日: 2010-11-26
公开(公告)号: CN102030316A 公开(公告)日: 2011-04-27
发明(设计)人: 谢志雄;庞代文;张鹏;李勇 申请(专利权)人: 武汉大学
主分类号: C01B19/04 分类号: C01B19/04;C12P3/00
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 王敏锋
地址: 430072*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 酵母 细胞 中硒化镉 量子 提取 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种微生物细胞内合成的量子点的提取、纯化方法,其步骤是: 

1)酵母细胞壁的裂解:取已合成硒化镉量子点的酵母细胞培养液,4000 g离心1-3 min,收集细胞沉淀,重悬于细胞裂解缓冲液中,按4000 U/1010细胞的量加入细胞溶解酶,30℃摇床,100 r/min振荡孵育4-6 h至溶液变透明为止;

2)酵母细胞的破碎:10000 g离心9-11 min,收集1)步骤处理过的细胞,重悬于细胞裂解缓冲液 中,加入蛋白酶抑制剂;400 W超声波处理裂解细胞;

3)硒化镉量子点的粗分离:将2)步骤处理过的样品于4000 g离心9-11 min,吸取含量子点的黄色上清,将含量子点的粗提物与细胞碎片初步分离;

4)硒化镉量子点的细分离:向3)步骤中离心收集的黄色上清中加入十二烷基硫酸钠至终浓度为2%,轻轻摇匀,室温静置9-11 min,10000 g离心28-32min,取上清用0.22 mm滤膜过滤,然后用50 K MWCO超滤管进行超滤、水洗;

5)硒化镉量子点的纯化:将4)步骤中获得的样品进行聚蔗糖400密度梯度离心,113000 g离心3-5 h,取出密度梯度离心后的黄色分层;50 K MWCO超滤管进行超滤、水洗,即得到纯化的硒化镉量子点。

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