[发明专利]酵母细胞中硒化镉量子点提取、纯化方法有效
| 申请号: | 201010562410.7 | 申请日: | 2010-11-26 | 
| 公开(公告)号: | CN102030316A | 公开(公告)日: | 2011-04-27 | 
| 发明(设计)人: | 谢志雄;庞代文;张鹏;李勇 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 | 
| 主分类号: | C01B19/04 | 分类号: | C01B19/04;C12P3/00 | 
| 代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 | 
| 地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 酵母 细胞 中硒化镉 量子 提取 纯化 方法 | ||
1.一种微生物细胞内合成的量子点的提取、纯化方法,其步骤是:
1)酵母细胞壁的裂解:取已合成硒化镉量子点的酵母细胞培养液,4000 g离心1-3 min,收集细胞沉淀,重悬于细胞裂解缓冲液中,按4000 U/1010细胞的量加入细胞溶解酶,30℃摇床,100 r/min振荡孵育4-6 h至溶液变透明为止;
2)酵母细胞的破碎:10000 g离心9-11 min,收集1)步骤处理过的细胞,重悬于细胞裂解缓冲液 中,加入蛋白酶抑制剂;400 W超声波处理裂解细胞;
3)硒化镉量子点的粗分离:将2)步骤处理过的样品于4000 g离心9-11 min,吸取含量子点的黄色上清,将含量子点的粗提物与细胞碎片初步分离;
4)硒化镉量子点的细分离:向3)步骤中离心收集的黄色上清中加入十二烷基硫酸钠至终浓度为2%,轻轻摇匀,室温静置9-11 min,10000 g离心28-32min,取上清用0.22 mm滤膜过滤,然后用50 K MWCO超滤管进行超滤、水洗;
5)硒化镉量子点的纯化:将4)步骤中获得的样品进行聚蔗糖400密度梯度离心,113000 g离心3-5 h,取出密度梯度离心后的黄色分层;50 K MWCO超滤管进行超滤、水洗,即得到纯化的硒化镉量子点。
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