[发明专利]抑制血管生成的化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及海参共附生微生物发酵制备具有抑制血管生成作用的新的代谢产物1(4-乙酰基-5-羟基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)以及化合物2(4-乙酰基-5-甲氧基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)的制备及其抑制血管生成的用途。

背景技术

海洋微生物次级代谢产物的研究引起了越来越多的注意。海洋高盐、高压、贫营养或者少光照等特殊的生态环境，造就了海洋生物的多样性和特殊性，其海洋微生物的种类多达100余万种。据John教授2007年在《Natural ProductsReport》报道，2006年和2007年对比1965-2005年，海洋微生物有了个非常大的增长。目前各国已经从海洋细菌、放线菌、真菌等微生物中分离得到多种活性物质，并具有强烈的生物活性，例如抗菌、抗肿瘤、抗病毒等，其中有些已经进入了临床研究。已有文献报道具有二氢苯并呋喃结构的化合物具有抑制肿瘤血管生成的作用。某些苯并呋喃类化合物具有良好的抑制HUVEC(人脐带静脉内皮细胞)增殖活性，而且对抑制内皮细胞增殖具有很好的选择性。

肿瘤特别是恶性实体瘤是人类头号杀手。研究一直血管生成类抗肿瘤药物引起了人们越来越多的重视。与大、小鼠等模式生物一样，近年来斑马鱼(Daniorerio)也逐渐被用作人类疾病动物模型。其胚胎在发育24h时，体节间血管开始由背动脉出芽形成于相邻体节之间。此血管生成模式与肿瘤新生血管形成模式相近，因此斑马鱼胚胎可作为抑制血管生成类抗肿瘤药物的评价模型。

发明内容

本发明涉及一种利用微生物发酵制备一种新的代谢产物1(4-乙酰基-5-羟基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)以及化合物2(4-乙酰基-5-甲氧基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)的制备工艺、结构以及抑制血管生成的药理活性。

本发明从海参的共附生微生物的发酵培养物中提取分离得到一种抑制血管生成的化合物1和2，他是通式为

的化合物，其中R＝H或CH₃。

化合物1(4-乙酰基-5-羟基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)：Mp：113--115℃；¹H NMR：2.31(s)，2.24(s)，2.21(s)，1.57(d，6)，4.3(q，7.2)，10.8(s)；

¹³C NMR 169.4，167.7，159.2，148.5，136.6，125.3，124.5，102.7，39.1，29.3，17.3，14.5.11.7；IR：3385cm^-1，3208cm^-1，3005cm^-1，2963cm^-1，2935cm^-1，1800cm^-1，1699cm^-1，1601cm^-1，1577cm^-1；EIMS：[M]⁺234，[M-CO]⁺206，[M-CH₃CO]⁺191.

化合物2(4-乙酰基-5-甲氧基-3，6，7-三甲基苯并呋喃-2-酮)：

Mp：120--121℃；¹H NMR：2.31(s)，2.26(s)，2.22(s)，1.58(d，6)，3.5(s)，4.3(q，7.2)；¹³C NMR 169.5，167.8，159.3，148.7，136.9，125.3，124.7，102.7，50.2，39.1，29.3，17.4，14.6.11.9；IR：3000cm^-1，2957cm^-1，2920cm^-1，1770cm^-1，1659cm^-1，1600cm^-1，1520cm^-1，

一种抑制血管生成的化合物的制备方法，它包括如下步骤：

1)从海参中，利用PDA马铃薯葡萄糖琼脂进行培养，得到链格孢霉(Alternaria sp.)HS-3，2。菌落初白色，渐变为黑绿色，基质黑色分生孢子梗单枝，长短不一，顶生不分枝，分生孢子有纵横隔膜，倒棍棒形、卵形；