[发明专利]一种快速检测绵羊多胎FecB基因的方法无效
| 申请号: | 201010544992.6 | 申请日: | 2010-11-16 | 
| 公开(公告)号: | CN101979659A | 公开(公告)日: | 2011-02-23 | 
| 发明(设计)人: | 管峰;石国庆;杨利国;刘守仁;艾君涛;万鹏程 | 申请(专利权)人: | 新疆农垦科学院 | 
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 | 
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 | 
| 地址: | 832000 新*** | 国省代码: | 新疆;65 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 检测 绵羊 fecb 基因 方法 | ||
1.一种快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,利用特异性上游引物F1、下游引物R1和参照上游引物F2、参照下游引物R2共同对待测绵羊基因组DNA扩增,然后对PCR扩增产物进行电泳分析,确定序列扩增产物中条带大小和数目;其中,
上游引物F1:5′--GCTGGTTCCGAGAGACGAAAATATAGCG--3′;
下游引物R1:5′--GTTTTCATGCCTCATCAACACCGGCT--3′;
参照上游引物F2:5′--TCAGATGGTGAAACAGATTGGAAA-3′;
参照下游引物R2:5′-AGAAAGAGAGGAAAGCTAGGAAACC--3′。
2.根据权利要求1所述的快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,所述PCR扩增条件为:PCR反应总体积20μL,其中:基因组DNA 50~100ng,10×buffer2μL;MgCL2 1.5mmol/L;dNTP浓度0.2mmol/L;DNA Taq酶1.0U;特异引物F1和R1各20pmol;参照引物F2和R2各5pmol;加双蒸水至20μL;PCR反应程序:94℃预变性5min;94℃30s,62℃30s,72℃30s,循环30次;72℃延伸5min。。
3.根据权利要求1所述的快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,所述电泳分析中,取PCR产物8μL经10%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色。
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