[发明专利]一种快速检测绵羊多胎FecB基因的方法无效

专利信息
申请号: 201010544992.6 申请日: 2010-11-16
公开(公告)号: CN101979659A 公开(公告)日: 2011-02-23
发明(设计)人: 管峰;石国庆;杨利国;刘守仁;艾君涛;万鹏程 申请(专利权)人: 新疆农垦科学院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 832000 新*** 国省代码: 新疆;65
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 检测 绵羊 fecb 基因 方法
【权利要求书】:

1.一种快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,利用特异性上游引物F1、下游引物R1和参照上游引物F2、参照下游引物R2共同对待测绵羊基因组DNA扩增,然后对PCR扩增产物进行电泳分析,确定序列扩增产物中条带大小和数目;其中,

上游引物F1:5′--GCTGGTTCCGAGAGACGAAAATATAGCG--3′;

下游引物R1:5′--GTTTTCATGCCTCATCAACACCGGCT--3′;

参照上游引物F2:5′--TCAGATGGTGAAACAGATTGGAAA-3′;

参照下游引物R2:5′-AGAAAGAGAGGAAAGCTAGGAAACC--3′。

2.根据权利要求1所述的快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,所述PCR扩增条件为:PCR反应总体积20μL,其中:基因组DNA 50~100ng,10×buffer2μL;MgCL2 1.5mmol/L;dNTP浓度0.2mmol/L;DNA Taq酶1.0U;特异引物F1和R1各20pmol;参照引物F2和R2各5pmol;加双蒸水至20μL;PCR反应程序:94℃预变性5min;94℃30s,62℃30s,72℃30s,循环30次;72℃延伸5min。。

3.根据权利要求1所述的快速检测绵羊多胎FecB基因的方法,其特征在于,所述电泳分析中,取PCR产物8μL经10%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色。

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