[发明专利]离子束辅助脉冲电泳的玉米转基因技术无效
申请号: | 201010543521.3 | 申请日: | 2010-11-12 |
公开(公告)号: | CN101979608A | 公开(公告)日: | 2011-02-23 |
发明(设计)人: | 程备久;朱苏文;赵阳;江海洋;彭晓剑 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;A01H5/00 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 汪旭东 |
地址: | 230036 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 离子束 辅助 脉冲 电泳 玉米 转基因 技术 | ||
1.离子束辅助脉冲电泳的玉米转基因技术,其特征在于:对成熟的玉米种子进行N离子注射后,将其置于特制的琼脂糖凝胶胶块中进行脉冲电泳,然后培养成苗的一种玉米转基因技术。
2.根据权利要求书1所述的离子束辅助脉冲电泳的玉米转基因技术,其特征在于:包括如下步骤:
(1) 选取成熟饱满的玉米种子,在0.1%的HgCl2中进行消毒15min,然后用无菌水冲洗3-5次,剥去种胚周围种皮;将消毒并剥皮的种子分单层、均匀排布在培养皿内,种胚朝向束流方向,进行N离子注射处理;
(2) 将处理后的种子置于包埋胶中,制作支持胶,然后将包埋玉米种子的包埋胶放入支持胶上,放入电泳槽,将要转化的外源基因样品注入支持胶起始位置的样孔内,开始电泳;
(3) 电泳结束后,将玉米种子放入MS培养基上成苗,然后移到大田,待3-4叶期进行除草剂抗性筛选和PCR检测。
3.根据权利要求1或2所述的离子束辅助脉冲电泳的玉米转基因技术,其特征在于:进行N离子注射处理时,剂量为2×1016 N+/cm2。
4.根据权利要求1或2所述的离子束辅助脉冲电泳的玉米转基因技术,其特征在于:电泳时间为120min。
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