[发明专利]多吡啶钌配合物[Ru(bpy)2(dppzi)]2+的应用和应用方法

权利要求书

1.一种多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用，所述多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺具有如下(1)式所示的结构式：

[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺中的bpy代表联吡啶，dppzi代表二吡啶[3，2-a：2’，3’-c]并吩嗪-11，12-咪唑；

其特征在于：所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺用作识别端粒DNA的G-quadruplex结构和i-motif结构的分子识别试剂。

2.如权利要求1所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用，特征在于：所述的端粒DNA为人的端粒DNA。

3.如权利要求1所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用，特征在于：所述的端粒DNA的G-quadruplex结构使用的DNA的核苷酸个数为22个，核苷酸序列为5′-AGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG-3′。

4.如权利要求1所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用，特征在于：所述的端粒DNA的i-motif结构使用的DNA的核苷酸个数为22个，核苷酸序列为5′-CCCTAACCCTAACCCTAACCCT-3′。

5.如权利要求1所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用方法，其特征在于：采用荧光滴定法识别端粒DNA的G-quadruplex结构和i-motif结构，该方法具体包括以下步骤：

1)将多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺溶于PH＝5.5的缓冲溶液，配制成浓度为5uM的配合物溶液；

2)取上述配合物溶液置于样品池中，用450nm可见光激发，观察发光情况；

3)用微量进样器往样品池中滴加5uL的DNA储备液，混匀5分钟后，用450nm可见光激发，观察溶液在610nm处的发光强度变化，反复往样品池中加入相同体积的DNA储备液，直到连续4次滴定荧光强度均无变化后停止滴定；

4)根据荧光强度的变化识别端粒DNA的G-quadruplx结构和i-motif结构，荧光强度显著增强表示DNA储备液中存在端粒DNA的G-quadruplex结构，荧光强度无显著变化表示DNA储备液中不存在端粒DNA的G-quadruplex结构或存在端粒DNA的i-motif结构。

6.如权利要求1所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用方法，特征在于：采用紫外滴定方法识别端粒DNA的G-quadruplx结构和i-motif结构，该方法具体包括以下步骤：

1)将多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺溶于PH＝5.5的缓冲溶液，配制成浓度为10uM的配合物溶液；

2)在紫外-可见吸收光谱仪的双光路系统中，对参比池和样品池做系统调零，基线稳定后，在参比池中加入500uL PH＝5.5的缓冲溶液做参比，在样品池中加入配合物溶液，用微量进样器每次往参比池和样品池中滴加相同体积的DNA储备液并混匀5分钟，直到连续4次滴定吸光度无变化后停止滴定；

3)在200-800nm范围内检测配合物的电子吸收光谱的变化；

4)根据吸收光谱减色率和红移情况识别端粒DNA的G-quadruplex结构和i-motif结构，在431nm处产生19.3％减色率且产生6nm红移的表示DNA储备液中存在端粒DNA的G-quadruplex结构，在431nm处产生10.9％减色率且产生3nm红移的表示DNA储备液中存在端粒DNA的i-motif结构。

7.如权利要求5或6所述的多吡啶钌配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的应用方法，特征在于：所述的PH＝5.5的缓冲溶液由KCl与Tris或NaCl与Tris配制而成。