[发明专利]一种血清铁含量的检测方法及其专用标准品

说明书

技术领域

本发明涉及一种血清铁含量的检测方法及其专用标准品。

背景技术

铁是人体正常生理过程中不可缺少的物质，几乎任何组织都含有铁。缺铁性贫血是铁缺乏最严重的疾病，血清铁的检测在临床诊断过程起着重要的作用。早在1966年，国际血液学标准化委员会(International Committee of Standardization inHaematology ICSH)开始推进血清铁检测的标准化进程，1970年8月在慕尼黑ICSH第8次会议上达成一致，随后发表了血清铁的推荐方法，推荐一种使用Bathophenanthroline sulfonate为色原的参考方法，三氯乙酸为蛋白沉淀剂，铁的标准浓度为2mg/L，分光光度计上在535nm波长比色。1978年ICSH对其进行了改进，蛋白沉淀的盐酸浓度由1971年提出的2mol/L降低为lmol/L，避免沉淀上清发生浑浊的情况发生。大量的实验发现，相对于色原Bathophenanthroline sulfonate来说，亚铁嗪(Ferrozine)灵敏度高25％，Ferene灵敏度高50％。1990年ICSH推荐使用亚铁嗪或Ferene做为色原，亚铁嗪使用562nm波长下比色，Ferene使用593nm波长比色。

美国临床和实验室标准协会(clinical and laboratory standards instituet，CLSI))在1990年提出了使用亚铁嗪为色原的分光光度法做为推荐标准方法，1998年确认将其做为标准方法。CLSI的标准方法与ICSH参考方法相同点是使用了相同的色原亚铁嗪，两个机构的方法均设置了蛋白沉淀的步骤。CLSI参考方法试剂组成与ICSH参考方法比较，增加了两个主要成分。其一是硫脲，作用是去除铜的干扰，其二是抗坏血酸，用于去除血红蛋白的干扰。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种血清铁含量的检测方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：

1)A、通过称量质量的方法得到所需质量的标准品溶液和所需质量的蛋白沉淀试剂，将所需质量的标准品溶液与所需质量的蛋白沉淀试剂混匀，放置；离心，收集上清液，记作上清液I；

B、通过称量质量的方法得到所需质量的上清液I和所需质量的色原试剂，将所需质量的上清液I与所需质量的色原试剂混匀，离心，取上清液，记作上清液II；

C、在562nm波长下检测上清液II的吸光度值；

D、以标准品溶液的浓度值为横坐标，以对应的吸光度值为纵坐标，建立一元线性回归曲线，即得到标准曲线；

2)通过称量质量的方法得到所需质量的待测样品，用所需质量的待测样品替换步骤1)中的标准品溶液，按照步骤1)中A-C的方法进行检测，得到待测样品对应的吸光度值；根据所述标准曲线，得到待测样品中铁的含量。

所述标准品溶液的按照如下方法制备：

1)通过称量质量的方法得到所需质量的铁和所需质量的水，将所需质量的铁用浓盐酸溶解后，加入所需质量的水，得到高浓度铁标准贮备液，所述铁离子在所述高浓度铁标准贮备液中浓度为1.0000mg/g；

2)通过称量质量的方法得到所需质量的步骤1)得到的高浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液，将所需质量的步骤1)得到的高浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液混合，得到中浓度铁标准贮备液，所述铁离子在所述中浓度铁标准贮备液中的浓度为50.0000μg/g；

3)通过称量质量的方法得到所需质量的步骤2)得到的中浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液，用所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液稀释所需质量的步骤2)得到的中浓度铁标准贮备液，得到标准品溶液；所述铁离子在所述标准溶液中的浓度为以下6种：0.2500ug/g、0.5000ug/g、1.0000ug/g、1.5000ug/g、2.0000ug/g和3.000ug/g。

所述步骤1)的步骤A中，标准品溶液的量为2.00±0.01g，所述蛋白沉淀试剂的量为2.08±0.01g；

所述步骤1)的步骤B中，上清液I的量为2.04±0.01g，所述色原试剂的量为1.14±0.01g；

所述步骤2)中，所述待测样品的量为2.02±0.01g；

所述步骤1)的步骤A中，所述放置的时间为15min，

所述离心力为1500g，所述离心的时间为15min；

所述步骤1)的步骤B中，所述离心力为1500g，

所述离心的时间为10min。