[发明专利]一种血清铁含量的检测方法及其专用标准品有效
| 申请号: | 201010532904.0 | 申请日: | 2010-11-02 |
| 公开(公告)号: | CN102053068A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
| 发明(设计)人: | 王清涛;黄妍;马怀安;徐静;张建平 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京朝阳医院 |
| 主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/38 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
| 地址: | 100020 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 血清 含量 检测 方法 及其 专用 标准 | ||
1.一种血清铁含量的检测方法,包括如下步骤:
1)A、通过称量质量的方法得到所需质量的标准品溶液和所需质量的蛋白沉淀试剂,将所需质量的标准品溶液与所需质量的蛋白沉淀试剂混匀,放置;离心,收集上清液,记作上清液I;
B、通过称量质量的方法得到所需质量的上清液I和所需质量的色原试剂,将所需质量的上清液I与所需质量的色原试剂混匀,离心,取上清液,记作上清液II;
C、在562nm波长下检测上清液II的吸光度值;
D、以标准品溶液的浓度值为横坐标,以对应的吸光度值为纵坐标,建立一元线性回归曲线,即得到标准曲线;
2)通过称量质量的方法得到所需质量的待测样品,用所需质量的待测样品替换步骤1)中的标准品溶液,按照步骤1)中A-C的方法进行检测,得到待测样品对应的吸光度值;根据所述标准曲线,得到待测样品中铁的含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述标准品溶液的按照如下方法制备:
1)通过称量质量的方法得到所需质量的铁和所需质量的水,将所需质量的铁用浓盐酸溶解后,加入所需质量的水,得到高浓度铁标准贮备液,所述铁离子在所述高浓度铁标准贮备液中浓度为1.0000mg/g;
2)通过称量质量的方法得到所需质量的步骤1)得到的高浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液,将所需质量的步骤1)得到的高浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液混合,得到中浓度铁标准贮备液,所述铁离子在所述中浓度铁标准贮备液中的浓度为50.0000μg/g;
3)通过称量质量的方法得到所需质量的步骤2)得到的中浓度铁标准贮备液和所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液,用所需质量的浓度为0.1mol/L的盐酸水溶液稀释所需质量的步骤2)得到的中浓度铁标准贮备液,得到标准品溶液;所述铁离子在所述标准溶液中的浓度为以下6种:0.2500ug/g、0.5000ug/g、1.0000ug/g、1.5000ug/g、2.0000ug/g和3.000ug/g。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述步骤1)的步骤A中,标准品溶液的量为2.00±0.01g,所述蛋白沉淀试剂的量为2.08±0.01g;
所述步骤1)的步骤B中,上清液I的量为2.04±0.01g,所述色原试剂的量为1.14±0.01g;
所述步骤2)中,所述待测样品的量为2.02±0.01g。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤1)的步骤A中,所述放置的时间为15min,所述离心力为1500g,所述离心的时间为15min;
所述步骤1)的步骤B中,所述离心力为1500g,所述离心的时间为10min。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:
所述蛋白沉淀试剂按照如下方法制备:将抗坏血酸、浓度为500g/l的三氯乙酸水溶液、浓度为6mol/l的盐酸水溶液和水混合,所述抗坏血酸、所述三氯乙酸和所述浓度为6mol/l的盐酸水溶液的配比为5g∶500g∶33ml;
所述色原试剂按照如下方法制备:将亚铁嗪、浓度为4mol/l的三水醋酸钠水溶液和硫脲混合,所述亚铁嗪、所述三水醋酸钠和所述硫脲的配比为525mg∶544.4g∶15g。
6.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:
所述标准品中,所述铁为铁标准物质SRM937。
7.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:
所述待测样本为无HIV疾病、无梅毒疾病、无肝炎疾病、无溶血、无黄疸且非乳糜的离体血清。
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