[发明专利]肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法

权利要求书

1.肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤①，将1.0～3.0×10⁶HCT116细胞接种至培养瓶中，培养至细胞贴壁；

步骤②，移除原有培养基，加入2～3ml的完全培养基和100μL的放射性培养基，并对培养瓶进行密封；所述的放射性培养基中含有¹⁴C-葡萄糖；

步骤③，加入2～3ml氢氧化海胺于闪烁瓶，将闪烁瓶瓶口密封；

步骤④，通过真空采血针组件分别连接培养瓶及闪烁瓶，放入37℃培养箱中培养15分钟至3小时；

步骤⑤，培养结束时，用医用注射器向培养瓶中一次性注入H₂SO₄，终止细胞代谢反应，将备用细胞计数；

步骤⑥，注射完毕后，令注射器活塞退至平衡位置，将整个装置在30～40℃下恒温静置12～24小时；

步骤⑦，向闪烁瓶内注入5～10mL闪烁液，并将闪烁瓶内的液体混匀至澄清，避光若干小时后，放入计数仪内，测量每分¹⁴C放射性计数，测定¹⁴CO₂的含量。

2.根据权利要求1所述的肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于：步骤②所述的¹⁴C-葡萄糖的添加量为0.1～2μCi。

3.根据权利要求1所述的肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于：步骤②所述的完全培养基添加量为2ml。

4.根据权利要求1所述的肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于：步骤②与步骤③所述的密封分别为用翻口乳胶塞和封口膜密封培养瓶瓶口；用翻口乳胶塞和封口膜密封闪烁瓶瓶口。

5.根据权利要求1所述的肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于：步骤④所述的真空采血针组件是两端带有针尖的联通导管，其两端的针尖分别连接培养瓶及闪烁瓶。

6.根据权利要求1所述的肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于：所述的计数仪为Quantulus 1220低本底液体闪烁计数仪。